【摘 要】
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轻链可变区和重链可变区基因产物等摩尔浓度混合后,用重叠延伸拼接法扩增出单链抗体基因,再用带限制性内切酶位点的引物(NcoⅠ和HindⅢ)扩增出带有特定酶切位点的单链抗体基
【机 构】
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河北农业大学动物科技学院河北农业大学中兽医学院
【基金项目】
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河北省自然科学基金资助项目(303226)
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轻链可变区和重链可变区基因产物等摩尔浓度混合后,用重叠延伸拼接法扩增出单链抗体基因,再用带限制性内切酶位点的引物(NcoⅠ和HindⅢ)扩增出带有特定酶切位点的单链抗体基因片段。NcoⅠ和HindⅢ双酶切单链抗体与表达载体pET-22b(+),用回收试剂盒回收酶切后的单链抗体与表达载体pET-22b(+)基因片段,用连接试剂盒将单链抗体与表达载体pET-22b(+)基因片段连接,并将连接产物转化感受态细胞JM109。氨苄青霉素筛选阳性重组子,以T7promoter/T7terminator primer进
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