不同样品制备方法对血浆双向凝胶电泳图谱的影响

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目的 探讨不同的样品制备方法对多发性大动脉炎患者血浆蛋白质组的双向凝胶电泳图谱的影响,为鉴定差异表达蛋白提供优化条件.方法 采用加入SDS加热法和离心超滤方法制备方法对血浆进行处理,和未经任何处理直接上样,以90μg等上样量进行电泳,电泳方法和常规的100μg银染和1000μg考马斯亮蓝染色方法的双向凝胶电泳的图谱的图像、蛋白点数等进行对比.结果 SDS加热法和离心超滤能明显改善图谱中白蛋白高丰度蛋白周围的显示.SDS加热法和离心超滤法90μg银染显示的蛋白点数分别为892.17±162.99,869.50±95.62,695.67±84.11.结论 对于多发性大动脉炎血浆采用SDS加热和离心超滤进行血浆样品制备,能明显改善血浆双向凝胶电泳图谱,以90 μg血浆上样量的银染方法较为合适.
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