Ad-VEGF_121和Ad-VEGF_165重组腺病毒的构建和制备

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目的:以pAdEasy—1缺陷性腺病毒系统为载体构建用于实验动物模型基因治疗的Ad—VEGF121,和Ad—VEGF165重组腺病毒。方法:采用RT—PCR方法从人心肌组织中扩增获得VEGF121、VEGF165cDNA片段,分别插入pUCm—T载体构成pUC—VEGFs;限制性内切酶Sal Ⅰ、KpnⅠ切下目的基因片段,插入pAdTrack—CMV载体相应的多克隆位点构成pAdTrack—CMV—VEGFs。电转法将被Pme Ⅰ切成线性的pAdTrack—CMV—VEGFs转入Ecoli BJ5183,
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