【摘 要】
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假禾谷镰孢巨型双链RNA病毒1 （Fusarium pseudograminearum megabirnavirus 1, FpgMBV1）是从假禾谷镰孢（Fusarium pseudograminearum）弱毒菌株FC136-2A中发现的一种真菌病毒。FpgMBV1共编码4个蛋白质,其中FpgMBV1-P4由268个氨基酸残基组成，功能未知。本研究设计特异性引物，采用反转录PCR （rever
【基金项目】
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国家自然科学基金国际（地区）合作与交流项目（31961143018）； 河南省科技攻关计划（农业领域）项目（212102110138）； 2018年度河南省高等学校青年骨干教师培养计划（2018GGJS032）； 河南农业大学科技创新基金（KJCX2020A14）；
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假禾谷镰孢巨型双链RNA病毒1 （Fusarium pseudograminearum megabirnavirus 1, FpgMBV1）是从假禾谷镰孢（Fusarium pseudograminearum）弱毒菌株FC136-2A中发现的一种真菌病毒。FpgMBV1共编码4个蛋白质,其中FpgMBV1-P4由268个氨基酸残基组成，功能未知。本研究设计特异性引物，采用反转录PCR （reverse transcription PCR, RT-PCR）方法从菌株FC136-2A的菌丝中扩增FpgMBV1-P4基因,构建原核表达载体pGEX4T-FpgMBV1-P4并转化大肠杆菌（Escherichia coli） BL21（DE3）菌株，在25℃以0.5mmol/L异丙基硫代半乳糖苷（isopropyl β-D-thiogalactoside, IPTG）诱导表达重组蛋白。结果表明，FpgMBV1-P4基因长为807 bp，重组表达的融合蛋白分子量约为60 kD，与预期大小相符。将该重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔（Lepus sinensis），获得抗血清，采用间接ELISA测定其效价达1∶160 000，能够特异性检测到假禾谷镰孢菌丝中约36 kD的FpgMBV1-P4蛋白。研究结果为深入分析FpgMBV1-P4的结构和功能及进一步探讨FpgMBV1与假禾谷镰孢菌的相互作用提供了基础。
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