【摘 要】
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为了低成本有效制备人参稀有皂苷C-K或F2,将A.niger g.848菌酶用于转化含有人参皂苷(质量分数)分别为49.6％Rb1,25.9％Rd,19.3％Rc和5.23％Rb2的西洋参二醇混合皂苷.霉菌发酵时,采用
【机 构】
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大连工业大学生物工程学院,大连116034韩国庆熙大学校韩方药生物技术学科,韩国京畿道446-701;葵花药业集团(天津)药物研究院,天津300457;大连大学生命科学与技术学院,大连,116622;
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为了低成本有效制备人参稀有皂苷C-K或F2,将A.niger g.848菌酶用于转化含有人参皂苷(质量分数)分别为49.6％Rb1,25.9％Rd,19.3％Rc和5.23％Rb2的西洋参二醇混合皂苷.霉菌发酵时,采用人参二醇皂苷诱导物比人参提取液诱导物的产酶总活力提高10％～15％.所产的2种诱导酶均能水解人参二醇皂苷的3-O-和20-O-多种糖基,均为人参皂苷酶Ⅰ型;但是人参二醇皂苷诱导物所产酶几乎全部转化人参二醇皂苷为C-K,而人参提取液诱导物所产酶则残留中间产物.使用黑曲霉人参二醇皂苷诱导所产酶,在转化西洋参二醇皂苷的动态研究中发现,酶反应1.5～2.5 h,主要为产物F2;酶反应12 h后,主要产物为C-K皂苷.基于此,40 g人参二醇类皂苷在45℃粗酶反应24 h,经处理得到含C-K质量分数为87％的23 g酶反应产物,C-K转化率达85％(摩尔分数).用40 g西洋参二醇皂苷在45℃粗酶反应2.5 h,经处理得到含有质量分数为58％的F2和27％的C-K的26 g酶反应产物,F2转化率为50.4％,C-K转化率为29.5％.通过人参二醇皂苷诱导的黑曲霉粗酶转化人参二醇类皂苷动态研究,建立了C-K转化率为85％,F2转化率为50％的制备方法,为大批量制备提供了基础依据.
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