百合花发育相关基因LLGLO1的RNAi载体构建

来源 :南京林业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenrg210

【摘要】

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百合花发育相关基因的研究是开展花卉分子育种的重要基础。以麝香百合（Lilium longiflorum Thumb．）未开放的花蕾为材料提取总RNA。根据LLGLO1序列的同源比对选取特异区段，设计引

【作者】

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席梦利刘坡吴小萍施季森

【机构】

：

南京林业大学

【出处】

：

南京林业大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2010年1期

【关键词】

：

百合 LLGLO1基因 RNAi载体

【基金项目】

：

江苏省高校自然科学重大基础研究项目(07KJA210019);国家自然科学基金项目(30972407)

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百合花发育相关基因的研究是开展花卉分子育种的重要基础。以麝香百合（Lilium longiflorum Thumb．）未开放的花蕾为材料提取总RNA。根据LLGLO1序列的同源比对选取特异区段，设计引物扩增区段cDNA并引入酶切位点。将PCR扩增片断连接到T载体上，经酶切及PCR验证后进行测序。测序结果表明：用于RNAi的cDNA片断与LLGLO1序列完全相同。通过中间载体pSK＋intron引入一段内含子间隔区，RNA干扰片断经过多次的酶切和连接过程最终连入表达载体pCAMBIA1301中形成ihpRN

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