【摘 要】
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为评估经反向遗传技术构建的3株H9N2亚型重组禽流感（AIV）病毒A3-PR8株、AH515-PR8株和TM343-PR8株的生物学特性和免疫原性,研究将3株重组毒株在鸡胚上连续传代,3株重组毒株均能在鸡胚中稳定增殖,红细胞凝集价达到9.0 log2。与对应的亲本分离株相比,重组毒株的病毒含量(EID50)提升0.5～0.8个滴度。以3株重组毒株为抗原制备油乳剂灭活疫苗,0.2 mL/只接种21日
【基金项目】
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“十三五”国家重点研发计划项目（2017YFD0500701-6）；
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为评估经反向遗传技术构建的3株H9N2亚型重组禽流感（AIV）病毒A3-PR8株、AH515-PR8株和TM343-PR8株的生物学特性和免疫原性,研究将3株重组毒株在鸡胚上连续传代,3株重组毒株均能在鸡胚中稳定增殖,红细胞凝集价达到9.0 log2。与对应的亲本分离株相比,重组毒株的病毒含量(EID50)提升0.5～0.8个滴度。以3株重组毒株为抗原制备油乳剂灭活疫苗,0.2 mL/只接种21日龄SPF鸡,免疫后第7、14、21、28天采血,测定血清中H9亚型AIV的血凝抑制试验（HI）抗体效价,结果显示,免疫后28 d三种疫苗免疫鸡几何平均HI效价都可达8.0 log2,AH515-PR8株免疫组抗体效价最高达8.8 log2。免疫后28 d分别以106.0EID50的剂量进行H9N2 AIV WJ57株的攻毒保护试验,在攻毒后,AH515-PR8和TM343-PR8组免疫鸡均不发病、不死亡,排毒量有明显下降,其中AH515-PR8株免疫组排毒量最低,5 d病毒分离率为0。研究表明,经反向遗传技术构建的AH515-PR8株相较于TM343-PR8株和A3-PR8株,更具有生长繁殖能力和强免疫原性的特点,为H9N2亚型禽流感疫苗的应用和开发提供了参考。
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