表达GFP和gpt基因的重组CVI988病毒的构建

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：laoyoutiaosc

【摘要】

：

以马立克氏病病毒（MDV）CVI988株基因组为模板，利用PCR技术扩增出约2．7和3．0kb的基因片段，将上述片段同时插入pUC19中，获得约5．5kb MDV同源重组臂；以该基因片段的US2区的BglⅡ为插入位

【作者】

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邱亚峰葛菲菲曹瑞兵周斌马志永陈溥言

【机构】

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中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室,上海市动物疫病预防控制中心,南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

马立克氏病病毒(MDV) 转移载体绿色荧光蛋白转染重组病毒 Marek＇s disease virus （MDV） transfer vector g

【基金项目】

：

基金项目：2007年人事部高层次留学人才回国资助项目和国家自然科学基金（No.30700593）资助.致谢：感谢中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室提供实验设施.

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以马立克氏病病毒（MDV）CVI988株基因组为模板，利用PCR技术扩增出约2．7和3．0kb的基因片段，将上述片段同时插入pUC19中，获得约5．5kb MDV同源重组臂；以该基因片段的US2区的BglⅡ为插入位点，分别插入基因表达盒CMV-gpt-ployA和CMV—gfp-polyA，构建转移载体pUS-gpt-GFP，将该载体瞬时转染CHO细胞，在荧光显微镜下，可以观察到绿色荧光蛋白的表达；将该转移载体转染已用MDV CVI998株感染的次代CEF细胞，利用MX-HAT培养基筛选重组病毒，并用荧光

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