【摘 要】
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AtGRP7基因是拟南芥的一个从动振荡器基因,目前其生理功能知之甚少。为了更好地研究与AtGRP7基因的互作蛋白,笔者利用PCR技术从携带AtGRP7基因序列的质粒中扩增该基因的编码
【机 构】
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热带生物资源教育部重点实验室/生物科学技术研究所、海南大学农学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31060107);教育部高等学校博士学科点专项科研基金博导类项目(20104601110003)资助
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AtGRP7基因是拟南芥的一个从动振荡器基因,目前其生理功能知之甚少。为了更好地研究与AtGRP7基因的互作蛋白,笔者利用PCR技术从携带AtGRP7基因序列的质粒中扩增该基因的编码序列,然后将目标序列插入pGBKT7载体的NcoⅠ和PstⅠ2个酶切位点之间,构成酵母双杂体系的诱饵载体。酶切和测序结果表明,构建的载体目标基因序列和阅读框是正确的。之后,将该载体转入感受态酵母Y2HGold菌株中,并检测其表达物对报告基因的激活情况。AtGRP7酵母转化菌在SD/-Trp平板上长势良好;在SD/-Trp/-Ade平板上长势较弱;在SD/-Trp/-His和SD/-Trp/-Ade/-His平板上则没有生长。这说明His合成相关基因没有被转录和翻译,AtGRP7基因在该酵母双杂体系中没有自转录激活。笔者在酵母双杂的初步筛选中,还获得几个可能与AtGRP7互作的基因。
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