PPA Rβ/δ 激动剂联合人自体关节液来源的间充质干细胞治疗骨关节炎的实验研究

来源 :国际骨科学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:radicafrank
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目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)β/δ激动剂(GW0742)对人关节液来源的间充质干细胞(hSF-M SC)成软骨分化及炎性环境下炎症因子释放的影响.方法 抽取膝关节骨关节炎患者患侧关节腔内的关节液并分离培养及鉴定.设置空白对照组(不完全成软骨诱导培养基)、转化生长因子(TGF)-β1组(含浓度为10 ng/mL TGF-β1的成软骨诱导培养基)、TGF-β1+GW0742组(含10 ng/mL TGF-β1、1μmol/L GW0742的成软骨诱导培养基)及GW0742组(含浓度为1μmol/L GW0742的成软骨诱导培养基),采用Pellet法诱导hSF-MSC成软骨分化.通过比较各组成软骨分化相关标志物SOX-9基因表达和蛋白合成以及阿利新蓝、甲苯胺蓝染色等来评估GW0742对hSF-MSC增殖及成软骨分化能力的影响.另设置空白对照组(20% 关节液+80% 完全培养基)、hSF-MSC组(20% 关节液+80% 完全培养基+1×105个/mL hSF-MSC)、hSF-MSC+GW0742组(20% 关节液+80% 完全培养基+1μmol/L GW0742+1×105个/mL hSF-MSC),通过比较第1、3天各组培养液中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α表达来评估GW0742+hSF-MSC组免疫抑制能力.结果 应用直接贴壁法成功从炎性关节液中分离培养hSF-MSC.TGF-β1、TGF-β1+GW0742及GW0742对hSF-MSC增殖能力无明显影响;聚合酶链反应(PCR)和Western Blot检测表明,GW0742组hSF-MSC成软骨分化作用最为明显;甲苯胺蓝和阿利新蓝染色显示,GW0742组hSF-MSC能分泌较多的蛋白聚糖,且较TGF-β1+GW0742组细胞分泌的蛋白聚糖更为致密;hSF-MSC+GW0742组炎症因子表达显著低于hSF-MSC组.结论 PPARβ/δ激动剂GW0742不仅能提升hSF-MSC成软骨分化能力,还能增强hSF-MSC抗炎能力.
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