【摘 要】
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目的:研究TET2蛋白(ten-eleven translocation 2)对巨噬细胞白介素-1受体相关激酶-M(interleukin-1 recepto-associated kinase-M,IRAK-M)表达的影响,探讨细菌内毒素(endotox
【机 构】
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重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心;
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目的:研究TET2蛋白(ten-eleven translocation 2)对巨噬细胞白介素-1受体相关激酶-M(interleukin-1 recepto-associated kinase-M,IRAK-M)表达的影响,探讨细菌内毒素(endotoxin/lipopolysaccharide,LPS)刺激诱导TET2表达的上游信号通路。方法:用LPS刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7诱导内毒素耐受,qPCR和Western blot检测LPS刺激不同时间点和内毒素耐受时IRAK-M和TET2表达;用siRINA干扰TET2表达,qPCR和Western blot检测对IRAK-M表达的影响;NCBI中搜索IRAK-M基因启动子序列,在线分析其启动子甲基化位点;用促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路抑制剂预处理细胞,再用LPS刺激,qPCR和Western blot检测对TET2表达的影响。结果:TET2蛋白和IRAK-M在LPS刺激RAW264.7细胞诱导内毒素耐受后仍持续表达,且表达模式都和细胞因子表达模式相反;干扰TET2表达抑制IRAK-M mRNA(P=0.000)和蛋白水平表达;抑制MAPK信号通路抑制TET2表达。结论:巨噬细胞炎症反应过程中MAPK信号通路上调TET2表达,TET2通过促进IRAK-M表达促进内毒素耐受。
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