新疆紫草咖啡酸及迷迭香酸糖基转移酶的克隆及功能研究

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咖啡酸及其衍生物是传统中药材紫草的重要水溶性有效成分,具有抗菌、抗氧化、保护心脑血管、抗肝纤维化和保肝、抗病毒及抗肿瘤等多种生物学活性.由于该类化合物经苯丙烷途径合成,而UDP-葡萄糖基转移酶(UDP-glycosyltransferases,UGTs)对苯丙烷途径的调控发挥重要作用,因此推测紫草细胞中存在糖基转移酶参与咖啡酸或/和其衍生物的修饰.该研究通过挖掘新疆紫草Arnebia euchroma转录组数据克隆获得15条糖基转移酶候选基因全长,并通过原核表达检测了对咖啡酸及迷迭香酸的体外活性.结果 表明AeUGT_01,AeUGT_02,AeUGT_03,AeUGT_04,AeUGT_10可催化咖啡酸或/和迷迭香酸生成1~3种糖基化产物.这些糖基转移酶处于不同的系统进化分支,与同分支其他糖基转移酶具有底物或催化功能的相似性.因此推测糖基转移酶不同分支通过独立进化不断扩张而产生了趋同进化现象,糖基转移酶的底物宽泛性是这一现象产生的基础.上述工作为进一步研究新疆紫草咖啡酸及迷迭香酸糖基转移酶体内功能奠定了基础,有助于明确咖啡酸衍生物的形成及调控机制;也为咖啡酸及迷迭香酸的糖基化修饰提供了工具酶.
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