【摘 要】
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背景:研究表明组织蛋白酶B(CB)与肿瘤转移相关.目的:用基因工程技术生产大量重组CB,为研究CB的生物学特性和制备CB抗体供临床检测作准备.方法:用重组痘苗病毒转染真核细胞,采
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背景:研究表明组织蛋白酶B(CB)与肿瘤转移相关.目的:用基因工程技术生产大量重组CB,为研究CB的生物学特性和制备CB抗体供临床检测作准备.方法:用重组痘苗病毒转染真核细胞,采用真核表达目的蛋白CB,用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法鉴定目的蛋白.根据CB的分子量和等电点,用制备型电泳纯化蛋白.结果:痘苗病毒真核表达系统可以高效表达目的蛋白,产量为0.12 mg/108细胞.重组CB的分子量(31 kDa和25 kDa)、等电点(4.552～5.588)和免疫原性与天然CB一致.制备型电泳能简单、有效地纯化蛋白.结论:运用痘苗病毒真核表达系统可以高效表达CB.
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