甘蓝型油菜叶片蛋白质双向电泳体系优化

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比较了甘蓝型油菜叶片总蛋白质提取的2种不同方法,探讨了叶片蛋白质分离的双向凝胶电泳技术优化方案。结果表明:采用TCA/丙酮法较Tris—Cl法更适合蛋白质提取,选择pH为4~7的固相胶条和分离胶浓度为12%的聚丙烯酰胺凝胶(SDS—PAGE)能够使蛋白质得到充分分离,采用考马斯亮蓝G250染色剂进行2次染色,可提高2一DE分辨率和实验解析度,优化后的双向电泳体系能够分离出2000个以上的蛋白点,并且重复稳定性好。
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