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目的:基于系统药理学探讨乌头生物碱中化学成分对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响及其机制.方法:TCMSP数据库结合口服生物利用度(OB)≥30％,类药性(DL)≥0.18搜集草乌化学成分,通过Pubchem数据库以及Swiss Target Prediction数据库预测各化学成分的潜在作用靶点;从GeneCards数据库搜集类风湿性关节炎(RA)靶点,两者取交集,DAVID数据库进行基因本体(GO)分类富集分析和Pathway富集分析.Cytoscape构建“化学成分-潜在作用靶点-信号通路-疾病”网络拓扑图;结合STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络.体外实验通过LPS刺激RAW264.7巨噬细胞,建立体外巨噬细胞炎症模型,采用蛋白免疫印迹法检测乌头生物碱中化学成分对LPS诱导的RAW264.7细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α),环氧化酶(COX-2)蛋白表达的影响以及对JAK激酶(Janus kinase),核转录因子-κB(NF-KB)信号通路主要蛋白表达的影响.结果:通过TCMSP数据库检索以及查阅文献共得到27个化学成分,经筛选后(OB≥30％,DL≥0.18)得到12个化学成分,通过数据库预测并筛选后得到177个潜在作用靶点,与4 329个RA靶点取交集后得到97个靶点作为治疗RA的潜在作用靶点.通过DAVID数据库富集到生物过程(BP)经筛选后共32条(P＜0.01,FDR＜0.01);所处细胞中的位置(CC)经筛选后共有5个位置(P＜0.01,FDR＜0.01);分子功能(MF)经筛选后得到12种分子功能(P＜0.01,FDR＜0.01).通过构建网络拓扑图说明乌头生物碱在治疗RA时不同的化学成分可作用于相同靶点,同一化学成分也作用于不同的靶点;乌头生物碱既可通过不同靶点与同一通路相连接,也可通过同一靶点与不同通路相连接,说明不同的靶点具有协同作用,充分体现了乌头生物碱多成分、多靶点、多通路的复杂机制.加入不同浓度的LPS刺激(质量浓度为0～200μg·L-1)能够显著上调RAW264.7巨噬细胞COX-2蛋白表达水平(P＜0.05),说明炎症模型成功.与正常组比较,RAW264.7细胞炎症模型中TNF-α,COX-2蛋白表达显著增加(P＜0.05);与模型组比较,BLA,songorine,yunaconitine,karacoline各组TNF-α,COX-2蛋白表达水平不同程度降低(P＜0.05).与正常组比较,RAW264.7细胞炎症模型中白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK-4),NF-κB,JAK1,信号转导与转录激活因子3(STAT3)水平显著增加(P＜0.05);与模型组比较,BLA,songorine,yunaconitine,karacoline各组IRAK4,NF-κB,JAK1,STAT3水平显著降低(P＜0.05).结论:基于系统药理学和体外实验对相关靶点和信号通路进行分析,为了解RA的发病机制,揭示乌头生物碱治疗RA的分子机制提供新见解,也为蒙药在现代医学中的应用提供新思路.