真核表达载体pEGFP-N1-MKRN1的构建及其在Siha细胞中的表达

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：penguin669

【摘要】

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目的：构建真核表达载体pEGFP-N1-MKRN1并稳定转染人宫颈癌细胞系Siha细胞,检测MKRN1表达情况及对细胞增殖和凋亡的影响.方法：用RT-PCR技术从人胚肾细胞株HEK293细胞中获得MKRN1

【作者】

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石艳艳刘涛张琴袁成福卜友泉易发平刘革力宋方洲

【机构】

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重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室

【出处】

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第四军医大学学报

【发表日期】

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2009年23期

【关键词】

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MKRN1 pEGFP-N1载体 SIHA细胞增殖和凋亡 MKRN1 pEGFP-N1 vector Siha cell proliferation and

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金（30872758.30800410）

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目的：构建真核表达载体pEGFP-N1-MKRN1并稳定转染人宫颈癌细胞系Siha细胞,检测MKRN1表达情况及对细胞增殖和凋亡的影响.方法：用RT-PCR技术从人胚肾细胞株HEK293细胞中获得MKRN1的cDNA并将其插入表达载体pEGFP-N1中;构建的重组质粒经脂质体介导转染Siha细胞;Western Blot鉴定MKRN1在Siha细胞中的稳定表达.结果：RT-PCR成功地扩增出一条约1477 bp的片段,经限制性内切酶酶切分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,荧光显微镜下观察到稳定

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