论文部分内容阅读
目的
探讨微小RNA(miRNA，miR)-181b通过调控人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)表达对HepG2肝癌细胞的增殖与凋亡的影响。
方法利用脂质体Lipofectamine™3000将miR-181b inhibitor和miR-181b NC转入HepG2细胞中，实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-181b表达，噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力，细胞克隆形成实验检测细胞克隆能力，流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期，Real-time PCR法及Western blot法检测细胞中PTEN mRNA及蛋白表达水平，并进行荧光素酶报告基因分析。
结果miR-181b inhibitor组(0.23±0.02)中miR-181b表达量低于miR-181b NC组(1.00±0.01，P<0.05)；miR-181b inhibitor组细胞活力(0.37±0.03)低于miR-181b NC组(0.59±0.05，P<0.05)；miR-181b inhibitor组细胞克隆数目(37.64±3.70)低于miR-181 NC组(132.56±12.37，P<0.05)；miR-181b inhibitor组细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均高于miR-181b NC组(P<0.05)。miR-181b inhibitor组细胞周期G1期高于miR-181 NC组(P<0.05)，miR-181b inhibitor组PTEN的mRNA及蛋白表达量均高于miR-181 NC组(P<0.05)，且荧光素酶报告基因结果证实PTEN是miR-181b下游靶蛋白。
结论miR-181b inhibitor通过负性调控PTEN表达抑制HepG2细胞增殖，并诱导细胞凋亡。