【摘 要】
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目的:探讨斑联蛋白(zyxin)对血小板细胞骨架分布的调节作用.方法:分别取zyxin基因敲除(Zyx-/-)和野生型(WT)小鼠的血小板,分离血小板细胞骨架组分,应用Western blot分别检测
【机 构】
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苏州大学医学部,江苏省血液研究所,苏州大学附属第一医院,血液学协同创新中心,放射医学与防护国家重点实验室,卫生部血栓与止血重点实验室,江苏苏州215006
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目的:探讨斑联蛋白(zyxin)对血小板细胞骨架分布的调节作用.方法:分别取zyxin基因敲除(Zyx-/-)和野生型(WT)小鼠的血小板,分离血小板细胞骨架组分,应用Western blot分别检测细胞骨架组分中β-actin、α-actinin、filamin A及myosin ⅡA的表达;肌动蛋白聚合诱导剂(Jasplakinolide,Jas)诱导血小板肌动蛋白聚合,同法检测WT和Zyx-/-小鼠血小板细胞骨架组分中相关骨架蛋白的表达;将WT和Zyx-/-小鼠血小板于纤维蛋白原表面进行铺展,用Alexa Fluor 488偶联的鬼笔环肽标记肌动蛋白丝,比较WT和Zyx-/-小鼠血小板荧光强度.结果:Zyxin基因敲除后,血小板主要细胞骨架蛋白β-actin、α-actinin、filamin A及myosin ⅡA在静息以及Jas诱导的血小板细胞骨架组分中的含量较WT小鼠血小板明显增多.在纤维蛋白原表面铺展的血小板中,Zyx-/-小鼠血小板肌动蛋白丝含量较WT小鼠血小板增多.结论:Zyxin显著调节血小板细胞骨架分布,在维持血小板细胞骨架稳态中起着重要作用.
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