人可溶性白细胞介素—6受体基因在昆虫细胞内的克隆与表达

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在昆虫细胞中表达人可溶性白细胞介素-6受体(sIL-6R)基因。方法将人sIL-6R cDNA克隆至杆状病毒转移载体pAcGP67B中,再将重组转移载体质粒与野生病毒AcNPV DNA共转染昆虫细胞Sf9;经同源重组后,以终点稀释和斑点杂交法筛选重组杆状病毒;采用空斑分析法纯化重组的病毒,然后以纯化的重组病毒感染昆虫细胞Sf9。结果斑点杂交实验证实,纯化得到的重组病毒含有人sIL-6R基因;SDS-PAGE结果显示,表达产物sIL-6R相对分子质量为47 000左右;Western blot和受体配基结合
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