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目的构建人双突变型HIF-1α-A1α402-A1α564腺病毒表达载体,研究人双突变型低氧诱导因子1α基因对冠心病的血管新生作用。方法在业已完成的pShuttle2-HIF-1α-A1α564的基础上,用PCR定点突变的方法将其第402位脯氨酸密码子CCA突变为丙氨酸密码子GCA,构建成双突变HIF-1α真核表达载体pShuttle2-HIF-1α-A1α402-A1α564.通过体外连接法与线性化的腺病毒骨架质粒连接,重组成pAdeno-HIF-1α-A1α402-A1α564腺病毒质粒,经酶切及测序