传染性支气管炎病毒(IBV)各毒株普遍难以在体外传代培养。为研究限制IBV体外传代培养的影响因素,本研究首先应用流式细胞术检测IBV经典毒株M41囊膜与宿主细胞膜融合程度,发现M41可以在体外培养条件下侵入鸡细胞系LMH和DF1,但荧光定量PCR检测显示侵入的M41无法增殖。通过对比分析已发表的M41易感组织气管、非易感组织脾脏及LMH细胞全基因组转录谱数据,结果显示宿主细胞粘附、细胞周期、p53及SRC可能是M41在体外培养细胞中增殖的宿主决定因素。本研究通过在2D培养体系中预先孵育Gelatin和3D培养两种方式来调节细胞粘附的物理环境,发现两种方法均可以促进M41在体外培养细胞中的增殖;利用多种经典细胞周期抑制剂及p53和SRC活性调控分子预先处理LMH和DF1,发现细胞周期、p53活性及SRC活性对IBV体外增殖无显著影响,表明细胞粘附特性是影响IBV体外增殖的重要因素。本研究为IBV体外细胞培养体系的建立奠定了理论基础。