【摘 要】
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目的观察Kruppel样因子14(KLF14)基因过表达对肝细胞胰岛素信号通路以及AMP活化的蛋白激酶(AMPK)关键信号分子的影响，探讨KLF14影响糖代谢的分子机制。方法建立KLF14过表达的Hepa1-6肝癌细胞模型，分为空载组、胰岛素组、KLF14转染组和胰岛素＋KLF14处理组，采用[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法检测肝癌细胞对葡萄糖的摄取率。以Western印迹检测KLF14过表达
【机 构】
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400016 重庆医科大学检验医学院，临床生化教研室和教育部临床检验诊断学重点实验室,400016 重庆医科大学检验医学院，临床生化教研室和教育部临床检验诊断学重点实验室,重庆医科大学附属第二医院内分
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目的观察Kruppel样因子14(KLF14)基因过表达对肝细胞胰岛素信号通路以及AMP活化的蛋白激酶(AMPK)关键信号分子的影响，探讨KLF14影响糖代谢的分子机制。
方法建立KLF14过表达的Hepa1-6肝癌细胞模型，分为空载组、胰岛素组、KLF14转染组和胰岛素＋KLF14处理组，采用[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法检测肝癌细胞对葡萄糖的摄取率。以Western印迹检测KLF14过表达对胰岛素信号通路中各信号分子的磷酸化水平及磷酸烯醇式丙酮酸激酶(PEPCK)蛋白表达的影响。
结果胰岛素处理Hepa1-6细胞后，KLF14转染组与未转染组相比，葡萄糖摄取率明显升高(P<0.01)；胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物(IRS)1、蛋白激酶B(Akt)、AMPK、CREB转录共激活因子2(TORC2)的磷酸化水平均明显增加(P<0.01)；而且，糖原合成酶激酶3β的磷酸化水平亦明显增加，而PEPCK的蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.01)。
结论KLF14过表达可能通过活化胰岛素InsR/IRS/Akt经典通路，从而改善肝细胞的胰岛素抵抗，且可能通过AMPK/TORC2/PEPCK信号通路抑制肝糖异生，并促进糖摄取和肝糖原的合成，从而改善糖代谢。
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