【摘 要】
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RBL-2H3细胞是体外研究变态反应的常用细胞,为了建立RBL-2H3细胞脱颗粒检测模型,以C48/80作为阳性药物,分析比较了细胞形态观测法、台盼蓝染色法、β-氨基己糖苷酶释放率及钙
【机 构】
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河北大学药学院,河北省药物质量分析控制重点实验室,河北大学科学技术处
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81202338);河北省自然科学基金资助项目(H2016201121);河北省高等学校科学技术研究项目(ZD2017010);国家级大学生创新创业训练计划项目(201610075007;201710075016);河北省研究生创新项目(CXZZSS2017014);河北大学实验室开放项目(sy201665)
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RBL-2H3细胞是体外研究变态反应的常用细胞,为了建立RBL-2H3细胞脱颗粒检测模型,以C48/80作为阳性药物,分析比较了细胞形态观测法、台盼蓝染色法、β-氨基己糖苷酶释放率及钙离子质量浓度检测等细胞脱颗粒检测方法.通过对C48/80作用质量浓度及时间的摸索,建立C48/80刺激RBL-2H3细胞脱颗粒的最佳药物作用条件.结果表明,β-氨基己糖苷酶释放率与细胞脱颗粒程度存在显著量-效关系,且操作简单、结果稳定.C48/80工作质量浓度为60μg/mL,最佳作用时间40 min.在此基础上,优化了DNPIgE/DNP-BSA诱导细胞脱颗粒体系,0.4μg/mL DNP-IgE致敏RBL-2H3细胞过夜,10μg/mL DNP-BSA诱导细胞,细胞脱颗粒程度最严重.同时发现,不同释放介质对DNP-BSA诱导细胞脱颗粒有显著影响.该结果可为变态反应相关研究提供实验基础.
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