【摘 要】
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目的 筛选关节软骨组织工程种子细胞优化获取的高效促增殖剂。 方法 采用培养细胞3H -胸腺嘧啶脱氧核苷 (3H -TdR)掺入实验、四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢检测及Ⅰ、Ⅱ型胶原
【机 构】
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第三军医大学附属西南医院骨科; 第三军医大学附属西南医院骨科; 第三军医大学附属西南医院骨科 400038重庆北京军区总医院骨科; 100700; 400038
【基金项目】
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国家自然科学基金重点资助项目 (3 980 10 0 );全军“十0000五”医药卫生科研基金重点资助项目 (0 1Z0 72 )
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目的 筛选关节软骨组织工程种子细胞优化获取的高效促增殖剂。 方法 采用培养细胞3H -胸腺嘧啶脱氧核苷 (3H -TdR)掺入实验、四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢检测及Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)分析方法 ,比较一定浓度维生素C(vitaminC ,VC) +骨形态发生蛋白 2 (bonemorphogeneticprotein 2 ,BMP2 )、类胰岛素生长因子 1(insulin -likegrowthfac tor1,IGF1 ) (体积分数为 2 %的血清培养时 )及碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、转化生长因子 - β1 (transforminggrowthfactor- β1 ,TGF - β1 ) (体积分数为 10 %的血清培养时 )对适宜密度接种、体外单层传代培养兔关节软骨细胞的促增殖作用。 结果 适宜浓度VC +BMP2 、IGF1 及bFGF、TGF - β1 均可促进体外传代培养关节软骨细胞的分裂增殖。增殖后的培养细胞仍具有其特异性表型表达 ,而IGF1 培养的细胞则有向成骨样细胞分化的趋向。其综合效能依次为 :VC +BMP2 >bFGF >TGF - β1 >IGF1 。 结论 一定浓度VC +BMP2 及bFGF对适宜密度接种、体外单层传代培养关节软骨细胞具有显著的促增殖作用 ;其中VC +BMP2 具有经济、高效的优点。
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