【摘 要】
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目的 应用原核表达系统研究提高重组表皮生长因子（rhEGF）产量的方法。方法用RT—PCR方法克隆hEGF基因并插入表达载体pGEX-4T-1，获得重组的表达质粒pGEX-4T-1-hEGF转化大肠杆菌BL
【机 构】
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哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室,省部共建教育部生物医药工程重点实验室
【基金项目】
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黑龙江省教育厅科研项目(11531181)
论文部分内容阅读
目的 应用原核表达系统研究提高重组表皮生长因子（rhEGF）产量的方法。方法用RT—PCR方法克隆hEGF基因并插入表达载体pGEX-4T-1，获得重组的表达质粒pGEX-4T-1-hEGF转化大肠杆菌BL21并筛选得到工程菌株，以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导目的蛋白表达，亲和层析纯化rhEGF，MTT法测定活性。结果成功扩增获得hEGF基因，部分表达产物为可溶性的、部分形成包涵体。菌体裂解上清液经亲和层析纯化后纯度达98％，复性后的rhEGF具有促细胞生长活性。结论成功构建并原核表达了重组人表皮生长
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