狗牙周膜成纤维细胞的体外培养及其生物学活性

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目的:建立一种简便、可靠的牙周膜成纤维细胞(PDLFs)原代分离培养方法,并探讨PDLFs作为牙周组织工程种子细胞的可行性。方法:采用改良组织块法,全麻下拔狗上颌第3切牙,刮取牙周膜,以玻璃片覆盖组织块贴壁替代传统的干燥贴壁法。细胞培养成功后传代,用四甲基偶氮唑蓝比色、免疫组化染色、VonKossa染色等方法测定其生物学活性。结果:PDLFs原代培养成功率达到89%,免疫组化检测结果为波形丝蛋白阳性,角蛋白阴性,体外培养PDLFs可自然形成矿化结节。结论:采用改良组织块法可以简便、稳定获取原代PDLFs。体外培养PDLFs具有部分成骨样细胞表型特征,可作为牙周组织工程种子细胞来源。
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