子宫内膜来源间充质干细胞对子宫内膜癌HEC-1B细胞上皮-间质转化的影响

来源 :中华实用诊断与治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunapplesun
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目的 探讨子宫内膜来源间充质干细胞(endometrium-derived mesenchymal stem cells,EMSCs)对子宫内膜癌HEC-1B细胞上皮-间质转化的影响及对Notchl信号通路的作用.方法 子宫肌瘤患者12例和子宫内膜腺癌10例,分别取其正常子宫内膜组织和子宫内膜腺癌组织,分离培养正常EMSCs和子宫内膜腺癌来源MSCs(endometrial adenocarcinoma derived mesenchymal stem cells,ECMSCs),应用流式细胞仪检测不同EMSCs表面抗原表达情况进行表型鉴定,浓缩EMSCs和ECMSCs培养上清.取对数生长期子宫内膜癌HEC-1B细胞,随机分为对照组(采用DMEM培养基培养)、EMSCs组(采用DMEM培养基+EMSCs浓缩上清培养)和ECMSCs组(采用DMEM培养基+ECMSCs浓缩上清培养).培养48 h后,观察细胞形态和生长情况,采用划痕实验检测细胞迁移率,采用Transwell小室实验检测侵袭细胞数,采用Western blot法检测细胞Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split homolog-1,Hesl)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)相对表达量.结果 获得EMSCs和ECMSCs,形状呈长梭形;均表达CD73、CD105、CD106,均不表达或低表达CD34、CD45,符合充质干细胞特征;3组HEC-1B细胞均生长良好,形态未发生明显变化,对照组、EMSCs组、ECMSCs组细胞密度依次增大;ECMSCs组细胞迁移率[(76.84±7.58)%]和侵袭细胞数[(146.70 ±14.57)个]大于EMSCs 组[(52.26 ±6.35)%、(96.50 ±12.42)个]和对照组[(21.23±5.51)%、(61.20±9.25)个](P<0.05),EMSCs组大于对照组(P<0.05);ECMSCs组细胞E-cadherin蛋白相对表达量(0.32±0.06)低于对照组(1.12 ±0.11)和EMSCs组(0.71 ±0.08)(P<0.05),EMSCs 组低于对照组(P<0.05).ECMSCs 组细胞 vimentin(1.03 ±0.10)、Notch1(1.15±0.11)、Jaggedl(0.97 ± 0.09)、Hesl(0.83 ± 0.08)蛋白相对表达量高于对照组(0.23 ±0.06、0.31 ±0.06、0.27 ±0.05、0.18 ±0.04)和EMSCs 组(0.65 ±0.08、0.83 ±0.09、0.78±0.09、0.57±0.05)(P<0.05),EMSCs 组高于对照组(P<0.05).结论 EMSCs 和ECMSCs 均可诱导子宫内膜癌HEC-1B细胞发生上皮-间质转化,提高细胞生长、迁移和侵袭能力,可能与激活Notchl通路有关.
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