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建立了测定乳制品中纳他霉素含量的高效液相色谱法。样品用甲醇萃取后进样,采用Thermo ODS-2250min×4.6mm色谱柱分离,流动相为乙酸铵与氯化铵的缓冲液:乙腈=4:1(体积比),加入5InL四氢呋喃(每升),紫外检测;A-R303nm,RSD为0.56%-0.82%(n=5),标准曲线r=0.9998,平均回收率分别为98.2%,最低检出限为0.05mg/L。本法具有操作简单、灵敏度高和准确性好等优点。