【摘 要】
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克隆牛布鲁氏菌的甲酰基转移酶基因(Wbkc),在大肠杆菌中表达/纯化,并对甲酰基转移酶的抗原性进行分析。以牛布鲁氏菌的染色体DNA为模板,扩增Wbkc基因,双酶切后克隆至pET-28a上,
【机 构】
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内蒙古民族大学成人教育学院,内蒙古民族大学动物科技学院,内蒙古民族大学农牧交错地带农业技术开发与应用研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31260608), 内蒙古自治区高等学校科学技术研究重点项目(NJZZ12117), 内蒙古自治区通辽市与内蒙古民族大学科技合作项目(sxzD2012131)
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克隆牛布鲁氏菌的甲酰基转移酶基因(Wbkc),在大肠杆菌中表达/纯化,并对甲酰基转移酶的抗原性进行分析。以牛布鲁氏菌的染色体DNA为模板,扩增Wbkc基因,双酶切后克隆至pET-28a上,在大肠杆菌BL21中诱导表达,His Trap FF层析柱纯化,Western blot鉴定甲酰基转移酶的抗原性。提取的重组质粒经PCR鉴定、双酶切鉴定和测序分析确定目的基因成功插入到了克隆载体中。SDS-PAGE分析证明,表达产物为相对分子质量29 000的融合蛋白。Western blot结果表明,表达的蛋白具有特异
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