【摘 要】
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设计了重组赖氨酸内肽酶蛋白氨基酸序列,根据P.Pastoris酵母密码子偏爱性原则设计c DNA序列,其中TGA和TAA为两个终止密码子序列,并在序列5’端和3’端分别设计Xho I（CTCGAG）和N
【机 构】
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重庆理工大学药学与生物工程学院,富进生物医药有限公司
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设计了重组赖氨酸内肽酶蛋白氨基酸序列,根据P.Pastoris酵母密码子偏爱性原则设计c DNA序列,其中TGA和TAA为两个终止密码子序列,并在序列5’端和3’端分别设计Xho I（CTCGAG）和Not I（GCGGCCGC）限制性酶切位点,将其重组到原核表达质粒p MD19-T中,得到p MD19-T-Lys-C,并在毕赤酵母中获得表达。应用SDS-PAGE电泳及免疫斑点法检测其表达,RP-HPLC分析重组赖氨酸内肽酶可以特异性切除赖氨酸基团C末端的氨基酸残基,证明该重组的赖氨酸内肽酶可替代Lysy
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