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1.大理学院药学院药理教研室,云南 大理 671000;2.大理学院药学院药化实验室,云南 大理 671000;
3.大理学院药学院,云南 大理 671000
【摘 要】:目的:研究高河菜提取物对积滞化热模型大鼠消化液成分的影响;方法:建立积滞化热模型后,测定模型大鼠胃酸含量及胃蛋白酶活性;结果:高河菜提取物能明显增加胃液分泌量,游离酸和总酸的酸度,提高胃蛋白酶活性,与模型组相比有统计学意义。 结论:高河菜提取物能治疗积滞化热证,其机制与增加胃酸分泌量和酸度,提高胃蛋白酶活性有关。
【关键词】:高河菜;积滞模型;胃酸;胃蛋白酶
【中图分类号】R284.3 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8517(2009)03(上)-0001-03
Effect of Megacarpaea delavayi Franch on digestive juice in rat with heat due to food stagnation
Shen Lei, Liu Xiaobo, Shi Guirong, Yang Yun, Li Bin
(School of Pharmacy, Dali University, Dali 671000)
Abstract Objective:To study the effect of Megacarpaea delavayi Franch on digestive juice in rat with heat due to food stagnation. Methods:The content of gastric acid and pepsase of each group were detected after building the food stagnation model. Results:Megacarpaea delavayi Franch can promote gastric acid secretion and increase pepsase compared with model group. Conclusion:Megacarpaea delavayi Franch can treat the food stagnation, whose mechanism is related to increase gastric acid and pepsase.
Key wordsMegacarpaea delavayi Franch, food stagnation model, gastric acid, pepsase
胃热积滞与胃肠功能障碍相关,而胃肠功能障碍又与胃分泌功能紊乱有十分密切的联系。高河菜,白族名为甘葛册(ganlgect),为白族特有药材,是十字花科植物高河菜(Megacarpaea delavayi Franch)的全草,味辛,性凉,清热健胃消食,民间用于“治胃热积滞,消化不良”[1]。为探讨其作用机制,本文研究了高河菜对积滞化热模型大鼠胃酸和胃蛋白酶的影响,现报道如下。
1 材料
1.1 药物试剂 高河菜提取物,称取4000g干燥全草,粉碎后加入到95%乙醇中冷浸,提取3次,分别浸泡48、24、24h,合并提取液过滤浓缩,得到浓缩液800g(1g浓缩液相当于5g生药),给药前用0.5%CMC-Na配制成所需浓度,药物剂量以g生药/kg表示。硫酸阿托品注射液,天津药业集团新郑股份有限公司(批号:0507091);江中健胃消食片,江中药业股份有限公司(批号:0807071)。
1.2 动物 SD大鼠,100~150g,雌雄各半,由云南生物制药有限公司提供,合格证号:SCXK(滇)2005-0010。
2 方法
2.1 分组与造模 大鼠48只,随机分为6组,每组8只。分别为空白对照组、模型对照组、阳性(江中健胃消食片)对照组(剂量为0.72g/kg)和高河菜提取物低、中、高剂量组(剂量分别为1、2、4g生药/kg)。实验时空白对照组给常规饲料,并腹腔注射1ml/kg生理盐水,每日两次;其他组给特制饲料(精制鱼松、黄豆粉、精制面粉、全脂奶粉按重量1:2:1:1,加适量蒸馏水制成),并腹腔注射阿托品0.25mg/kg,每日两次[2、3],各组均自由摄食和饮水,连续6天造模。实验第7日,各组均给常规饲料,空白对照与模型对照灌胃蒸馏水,各给药组灌服相应药物,连续7天。每日记录各组大鼠的体重、摄食量及大便情况。造模后大鼠的体重增长缓慢,第7天时体重低于对照组20%~30%,造模成功[2、3]。灌服高河菜和健胃消食片后大鼠体重增长较模型组恢复快。造模后大鼠的食量也明显减少,频频饮水,大便干结。灌服相应药物后,与模型组相比,食量明显增加,大便变软。
2.2 标本的采集 所有大鼠于实验前一天禁食禁水24h。实验时用乙醚麻醉大鼠,消毒皮肤,于剑突下沿腹白线开口,结扎幽门,经十二指肠末次给药一次,给药容量为1ml/100g,缝合创口。术后禁食禁水,5h后断颈处死动物,结扎贲门,取出胃,收集胃液于刻度离心管。
2.3 胃液量的测定[4] 以3000r/min离心10min,量取上清液,记录胃液量,以ml/5h表示。
2.4 胃酸分泌量的测定[5、6] 取清晰胃液1ml,加入甲基橙和酚酞指示剂各2滴,混匀,呈樱红色。用0.01mol/l NaOH标准溶液滴定,随滴随摇,直至樱红色消失,开始出现橙黄色时为止,这时所用的NaOH量为游离酸终点量。继续用0.01mol/lNaOH标准溶液滴定,至出现红色(微红色不退),这时所用的NaOH量总和为总酸度终点量。按下式计算游离酸和总酸度:游离酸(mmol/l)=游离酸度终点量×NaOH浓度×1000;总酸度(mmol/l)=总酸度终点量×NaOH浓度×1000。
2.5 胃蛋白酶活性的测定[5、6] 采用Mett法测定胃蛋白酶活性。先用毛细玻璃管吸满鸡蛋清,置70℃使蛋白凝固,制成蛋白管。吸取胃上清液1ml,加入15ml的盐酸(0.05 mol/l),放进两根蛋白管作为平行样,然后放进37℃恒温箱孵育24h。测量两根蛋白管四端透明部分的长度,记为X(mm),求平均值。胃蛋白酶活性单位(U/ml)=x2×16
2.6 统计学处理 采用SPSS13.0统计学软件处理,各组数据进行方差分析,组间差异用LSD法比较,数据以 ±s表示。
3 结果
3.1 高河菜提取物对胃酸分泌的影响
表1结果表明,与空白对照相比,胃热积滞模型大鼠的胃液分泌量减少,游离酸和总酸度下降。与模型组相比,高河菜提取物1、2、4g生药/kg和健胃消食片均能明显地促进胃酸分泌量;高河菜提取物对游离酸和总酸度的影响不是很明显,其中2、4g生药/kg能增加游离酸度,与模型组相比,P<0.05或P<0.01,4g生药/kg能增加总酸度,与模型组相比,P<0.05。
3.2 高河菜提取物对胃蛋白酶活性的影响
表2结果表明,与空白对照相比,模型大鼠的胃蛋白酶活性明显下降(P<0.01);高河菜提取物1、2g生药/kg和健胃消食片能明显提高胃蛋白酶活性,与模型组相比(P<0.01),而高河菜提取物4g生药/kg对胃蛋白酶活性改善不明显。
4 讨论
胃肠功能与胃肠动力和胃肠分泌有关。本研究采用给大鼠高蛋白、高热量饲料的同时腹腔注射阿托品,造成积滞化热模型。模型建成后大鼠体重增长缓慢,食量减少,活动烦躁,频频饮水,大便干结。这种模型大鼠的胃分泌功能受到明显抑制,胃酸分泌量减少,游离酸和总酸度下降,胃蛋白酶活性也下降,使得脘腹胀满,消化不良。
高河菜在云南大理地区是作为当地群众制作咸菜的一种材料,经验表明可以治疗胃热积滞、消化不良。根据这种用法,我们研究了高河菜提取物对积滞化热模型大鼠的影响,主要考察了对胃分泌功能的影响。结果表明,高河菜提取物1、2、4g生药/kg均能明显增加大鼠的胃液分泌量,甚至高于正常组,但对胃酸酸度的影响,仅4g生药/kg能增加酸度。高河菜提取物对胃蛋白酶的影响也不呈剂量依赖性,以2g生药/kg刺激胃蛋白酶分泌最明显,1g生药/kg作用也显著,但4g生药/kg的作用反而不明显。说明高河菜对于积滞化热的患者会有一定的治疗作用,机制主要与增加胃液分泌量有关,而对胃酸酸度的刺激和对胃蛋白酶活性的刺激作用与剂量相关。
参考文献
[1]方春生,王成军,李辉.高河菜对动物消化道运动功能的影响[J].云南中医中药杂志,2006,27(3):52.
[2]赵霞,任现志,陈永辉等.清热化滞颗粒对积滞化热模型小鼠胃肠激素的影响[J].中医药学刊,2003,21(9):1475-1476.
[3]邵瑛,唐纯志.悬灸足三里对疳积大鼠胃泌素和胃动素及体重的影响[J].中国中西医结合消化杂志,2005,13(2):112-114.
[4]宋小莉,牛欣.半夏泻心汤君药的药效学研究[J].时珍国医国药,2007,18(7):1584-1585.
[5]吴丽萍,王艳丽.小儿增食灵合剂对小儿厌食症动物模型胃蛋白酶活性和胃酸分泌量的影响[J].中医儿科杂志,2007,3(3):26-28.
[6]王晶,洪缨,杨雅信等.香砂和胃丸对芬氟拉明厌食模型大鼠胃分泌功能的影响[J].中成药,2007,29(8):1130-1133.
(收稿日期:2009.1.19)
3.大理学院药学院,云南 大理 671000
【摘 要】:目的:研究高河菜提取物对积滞化热模型大鼠消化液成分的影响;方法:建立积滞化热模型后,测定模型大鼠胃酸含量及胃蛋白酶活性;结果:高河菜提取物能明显增加胃液分泌量,游离酸和总酸的酸度,提高胃蛋白酶活性,与模型组相比有统计学意义。 结论:高河菜提取物能治疗积滞化热证,其机制与增加胃酸分泌量和酸度,提高胃蛋白酶活性有关。
【关键词】:高河菜;积滞模型;胃酸;胃蛋白酶
【中图分类号】R284.3 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8517(2009)03(上)-0001-03
Effect of Megacarpaea delavayi Franch on digestive juice in rat with heat due to food stagnation
Shen Lei, Liu Xiaobo, Shi Guirong, Yang Yun, Li Bin
(School of Pharmacy, Dali University, Dali 671000)
Abstract Objective:To study the effect of Megacarpaea delavayi Franch on digestive juice in rat with heat due to food stagnation. Methods:The content of gastric acid and pepsase of each group were detected after building the food stagnation model. Results:Megacarpaea delavayi Franch can promote gastric acid secretion and increase pepsase compared with model group. Conclusion:Megacarpaea delavayi Franch can treat the food stagnation, whose mechanism is related to increase gastric acid and pepsase.
Key wordsMegacarpaea delavayi Franch, food stagnation model, gastric acid, pepsase
胃热积滞与胃肠功能障碍相关,而胃肠功能障碍又与胃分泌功能紊乱有十分密切的联系。高河菜,白族名为甘葛册(ganlgect),为白族特有药材,是十字花科植物高河菜(Megacarpaea delavayi Franch)的全草,味辛,性凉,清热健胃消食,民间用于“治胃热积滞,消化不良”[1]。为探讨其作用机制,本文研究了高河菜对积滞化热模型大鼠胃酸和胃蛋白酶的影响,现报道如下。
1 材料
1.1 药物试剂 高河菜提取物,称取4000g干燥全草,粉碎后加入到95%乙醇中冷浸,提取3次,分别浸泡48、24、24h,合并提取液过滤浓缩,得到浓缩液800g(1g浓缩液相当于5g生药),给药前用0.5%CMC-Na配制成所需浓度,药物剂量以g生药/kg表示。硫酸阿托品注射液,天津药业集团新郑股份有限公司(批号:0507091);江中健胃消食片,江中药业股份有限公司(批号:0807071)。
1.2 动物 SD大鼠,100~150g,雌雄各半,由云南生物制药有限公司提供,合格证号:SCXK(滇)2005-0010。
2 方法
2.1 分组与造模 大鼠48只,随机分为6组,每组8只。分别为空白对照组、模型对照组、阳性(江中健胃消食片)对照组(剂量为0.72g/kg)和高河菜提取物低、中、高剂量组(剂量分别为1、2、4g生药/kg)。实验时空白对照组给常规饲料,并腹腔注射1ml/kg生理盐水,每日两次;其他组给特制饲料(精制鱼松、黄豆粉、精制面粉、全脂奶粉按重量1:2:1:1,加适量蒸馏水制成),并腹腔注射阿托品0.25mg/kg,每日两次[2、3],各组均自由摄食和饮水,连续6天造模。实验第7日,各组均给常规饲料,空白对照与模型对照灌胃蒸馏水,各给药组灌服相应药物,连续7天。每日记录各组大鼠的体重、摄食量及大便情况。造模后大鼠的体重增长缓慢,第7天时体重低于对照组20%~30%,造模成功[2、3]。灌服高河菜和健胃消食片后大鼠体重增长较模型组恢复快。造模后大鼠的食量也明显减少,频频饮水,大便干结。灌服相应药物后,与模型组相比,食量明显增加,大便变软。
2.2 标本的采集 所有大鼠于实验前一天禁食禁水24h。实验时用乙醚麻醉大鼠,消毒皮肤,于剑突下沿腹白线开口,结扎幽门,经十二指肠末次给药一次,给药容量为1ml/100g,缝合创口。术后禁食禁水,5h后断颈处死动物,结扎贲门,取出胃,收集胃液于刻度离心管。
2.3 胃液量的测定[4] 以3000r/min离心10min,量取上清液,记录胃液量,以ml/5h表示。
2.4 胃酸分泌量的测定[5、6] 取清晰胃液1ml,加入甲基橙和酚酞指示剂各2滴,混匀,呈樱红色。用0.01mol/l NaOH标准溶液滴定,随滴随摇,直至樱红色消失,开始出现橙黄色时为止,这时所用的NaOH量为游离酸终点量。继续用0.01mol/lNaOH标准溶液滴定,至出现红色(微红色不退),这时所用的NaOH量总和为总酸度终点量。按下式计算游离酸和总酸度:游离酸(mmol/l)=游离酸度终点量×NaOH浓度×1000;总酸度(mmol/l)=总酸度终点量×NaOH浓度×1000。
2.5 胃蛋白酶活性的测定[5、6] 采用Mett法测定胃蛋白酶活性。先用毛细玻璃管吸满鸡蛋清,置70℃使蛋白凝固,制成蛋白管。吸取胃上清液1ml,加入15ml的盐酸(0.05 mol/l),放进两根蛋白管作为平行样,然后放进37℃恒温箱孵育24h。测量两根蛋白管四端透明部分的长度,记为X(mm),求平均值。胃蛋白酶活性单位(U/ml)=x2×16
2.6 统计学处理 采用SPSS13.0统计学软件处理,各组数据进行方差分析,组间差异用LSD法比较,数据以 ±s表示。
3 结果
3.1 高河菜提取物对胃酸分泌的影响
表1结果表明,与空白对照相比,胃热积滞模型大鼠的胃液分泌量减少,游离酸和总酸度下降。与模型组相比,高河菜提取物1、2、4g生药/kg和健胃消食片均能明显地促进胃酸分泌量;高河菜提取物对游离酸和总酸度的影响不是很明显,其中2、4g生药/kg能增加游离酸度,与模型组相比,P<0.05或P<0.01,4g生药/kg能增加总酸度,与模型组相比,P<0.05。
3.2 高河菜提取物对胃蛋白酶活性的影响
表2结果表明,与空白对照相比,模型大鼠的胃蛋白酶活性明显下降(P<0.01);高河菜提取物1、2g生药/kg和健胃消食片能明显提高胃蛋白酶活性,与模型组相比(P<0.01),而高河菜提取物4g生药/kg对胃蛋白酶活性改善不明显。
4 讨论
胃肠功能与胃肠动力和胃肠分泌有关。本研究采用给大鼠高蛋白、高热量饲料的同时腹腔注射阿托品,造成积滞化热模型。模型建成后大鼠体重增长缓慢,食量减少,活动烦躁,频频饮水,大便干结。这种模型大鼠的胃分泌功能受到明显抑制,胃酸分泌量减少,游离酸和总酸度下降,胃蛋白酶活性也下降,使得脘腹胀满,消化不良。
高河菜在云南大理地区是作为当地群众制作咸菜的一种材料,经验表明可以治疗胃热积滞、消化不良。根据这种用法,我们研究了高河菜提取物对积滞化热模型大鼠的影响,主要考察了对胃分泌功能的影响。结果表明,高河菜提取物1、2、4g生药/kg均能明显增加大鼠的胃液分泌量,甚至高于正常组,但对胃酸酸度的影响,仅4g生药/kg能增加酸度。高河菜提取物对胃蛋白酶的影响也不呈剂量依赖性,以2g生药/kg刺激胃蛋白酶分泌最明显,1g生药/kg作用也显著,但4g生药/kg的作用反而不明显。说明高河菜对于积滞化热的患者会有一定的治疗作用,机制主要与增加胃液分泌量有关,而对胃酸酸度的刺激和对胃蛋白酶活性的刺激作用与剂量相关。
参考文献
[1]方春生,王成军,李辉.高河菜对动物消化道运动功能的影响[J].云南中医中药杂志,2006,27(3):52.
[2]赵霞,任现志,陈永辉等.清热化滞颗粒对积滞化热模型小鼠胃肠激素的影响[J].中医药学刊,2003,21(9):1475-1476.
[3]邵瑛,唐纯志.悬灸足三里对疳积大鼠胃泌素和胃动素及体重的影响[J].中国中西医结合消化杂志,2005,13(2):112-114.
[4]宋小莉,牛欣.半夏泻心汤君药的药效学研究[J].时珍国医国药,2007,18(7):1584-1585.
[5]吴丽萍,王艳丽.小儿增食灵合剂对小儿厌食症动物模型胃蛋白酶活性和胃酸分泌量的影响[J].中医儿科杂志,2007,3(3):26-28.
[6]王晶,洪缨,杨雅信等.香砂和胃丸对芬氟拉明厌食模型大鼠胃分泌功能的影响[J].中成药,2007,29(8):1130-1133.
(收稿日期:2009.1.19)