【摘 要】
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目的研究Bcl-xl基因在SH-SY5Y细胞中的表达。方法构建真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl,采用脂质体介导将重组质粒导入SH-SY5Y细胞,RT-PCR和Western-blot检测外源基因表达。结
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目的研究Bcl-xl基因在SH-SY5Y细胞中的表达。方法构建真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl,采用脂质体介导将重组质粒导入SH-SY5Y细胞,RT-PCR和Western-blot检测外源基因表达。结果本实验成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl,并用脂质体介导的方法高效转染SH-SY5Y细胞,RT-PCR显示有Bcl-xlmRNA表达增加,Western-blot显示有32kD的蛋白质表达增加。结论重组质粒pIRES2-EGFP/Bcl-xl经转染能够在SH-SY5Y细胞中高效表达,为进一步研究Bcl-xl对SH-SY5Y细胞的生物学功能奠定了基础。
Objective To study the expression of Bcl-xl gene in SH-SY5Y cells. Methods The eukaryotic expression vector pIRES2-EGFP / Bcl-xl was constructed. The recombinant plasmids were introduced into SH-SY5Y cells by liposome and the expression of foreign genes was detected by RT-PCR and Western-blot. RESULTS: The eukaryotic expression vector pIRES2-EGFP / Bcl-xl was successfully constructed and transfected into SH-SY5Y cells by liposome-mediated method. The expression of Bcl-xl mRNA was increased by RT-PCR and Western- 32kD protein expression increased. Conclusion The recombinant plasmid pIRES2-EGFP / Bcl-xl can be efficiently expressed in SH-SY5Y cells after transfection, which lays the foundation for the further study on the biological function of Bcl-xl in SH-SY5Y cells.
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