小干扰RNA对前列腺癌表皮生长因子受体及其胞内效应蛋白表达的影响

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目的 应用RNA小干扰(SiRNA)技术影响表皮生长因子受体(EGFR)及其胞内效应蛋白水平的表达,观察其对激素非依赖前列腺癌细胞在体外以及在实验裸鼠模型体内的生长情况的影响.方法 筛选出最有效的EGFR SiRNA,采用慢病毒为载体,转染激素非依赖前列腺癌细胞(HIPC)PC-3,MTT法检测细胞生长抑制情况,荧光实时定量PCR和Western印迹法检测细胞EGFR及其胞内效应蛋白Akt和MAPK的表达水平和磷酸化程度.同时,建立HIPC裸鼠模型,瘤体内注射EGFR SiRNA,观察肿瘤生长情况.结果慢病毒为载体的EGFR SiRNA对PC-3细胞转染率可稳定在75%,并显著抑制PC-3细胞生长率,仅为40%~50%,其作用可能为沉默细胞EGFR mRNA及其蛋白的表达,抑制效率>90%(P
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