【摘 要】
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目的:构建含人TIMP-2(hTIMP-2)基因的重组腺病毒载体并在大鼠主动脉平滑肌细胞中表达,为血管疾病基因治疗提供实验基础.方法:利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1以及
【机 构】
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解放军302医院,第二军医大学附属长海医院
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目的:构建含人TIMP-2(hTIMP-2)基因的重组腺病毒载体并在大鼠主动脉平滑肌细胞中表达,为血管疾病基因治疗提供实验基础.方法:利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1以及线性化的重组穿梭质粒pTrack-CMV-hTIMP-2共转化BJ5183受体菌,并在其中发生同源重组,利用重组前后抗性的改变筛选出重组子;重组腺病毒质粒AdhTIMP-2经过293细胞的包装,扩增和纯化后,测定病毒滴度.腺病毒体外感染大鼠主动脉平滑肌细胞,一步法提取细胞总RNA,RT-PCR检测hTIMP-2的mRNA
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