论文部分内容阅读
[英]/Smith DJ…∥Oral rnMicrobiol Immunol.-2000,15.-124～130rn本实验通过鼻内、胃肠道或皮下途径给予一种rn有生物附着性的多聚D,L-乳酸乙交脂(PLGA)GTFrn微粒,观察其诱导的免疫应答.rn材料和方法 GTF源于远缘链球菌株6715,经rn分离培养、亲和层析、FPLC液相层析、SDS-聚丙烯酰rn胺凝胶电泳分离纯化而得.PLGA(W/W为75/25)复rn合体经凝胶渗透层析测定分子量.微粒由10%远rn缘链球菌GTF和1%明胶与PLGA干混后经高压提rn炼而成.选鼠龄45d的SD大鼠作研究对象,鼻内rn免疫组和胃肠免疫组给予GTF明胶/PLGA微粒、rnPLGA/明胶微粒或GTF明矾,初次免疫4周,每周1rn次共4次,再次免疫3周,每周1次共3次.皮下注rn射组在唾液腺附近进针,给予GTF/明胶微粒/PLGArn或GTF明矾,共2次.初次免疫后第1、3、7、11周和rn再次免疫后第1、3、7周分别取尾静脉血和唾液,rnELISA测量血清IgG和唾液IgA抗体水平.rn结果体外实验表明2 h后GTF从PLGA微rn粒中释放至最大值,此时释放的GTF活性占总量的rn26%.远缘链球菌GTF诱导的唾液IgA抗体水平在rn鼻内注射后第28天后明显升高.6只鼠中的5只在rn鼻内给予GTF/明胶/PLGA微粒诱导唾液IgA抗体产rn生,该鼻内组平均唾液IgA抗体水平是其他胃肠组rn或皮下组的30倍,并且初次免疫后至少维持10周,rn仍然显著高于其他组.再次免疫后抗体水平更高,rn超过初次免疫的抗体峰值后持续约42d.而血清rnIgG,皮下注射2组诱导的IgG抗体水平均较高.在rn鼻内给予GTF微粒后,6只鼠中的4只初次免疫后rn第4周血清IgG抗体水平明显升高,再次免疫后血rn清IgG抗体水平升高超过10倍,与皮下注射2组水rn平相近,并且整个实验中,持续该高水平.rn讨论采用压缩、提取和研磨等技术使GTFrn进入PLGA微粒中,该制备程序并不影响GTF结构,rnGTF微粒诱导的免疫包括对某些构象依赖的抗原决rn定簇的免疫应答.rn体外实验表明GTF与PLGA结合后酶活性释放rn仅1/3,故粘膜免疫中PLGA微粒较明矾的GTF剂量rn高3倍,但微粒中的GTF并不会全部释放出来.本rn实验中皮下注射PLGA-GTF微粒比皮下注射GTF明rn矾(前者GTF是后者3倍)诱导的血清和唾液抗体rn水平均较低,间接表明鼻内注射组中PLGA-GTF微rn粒释放的GTF水平并不高于可溶性GTF即GTF明rn矾.rn鼻内给予PLGA-GTF微粒诱导的IgA抗体水平rn远远高于其他途径,也较GTF明矾高,这可能是由rn于肠较鼻/扁桃区域抗原易稀释或快速裂解,隔室现rn象的程度也可能导致该差异,因为鼻/扁桃体诱导rnIgA抗体水平较肠相关淋巴组织高,后者更利于诱rn导抗体在肠的表达.微粒的生物附着性使GTF微rn粒与粘膜表面接触时间增长,从而使抗原更有效诱rn导局部免疫应答.鼻内注射GTF-PLGA微粒再次免rn疫诱导的IgA抗体水平极高,甚至超过初次免疫峰rn值持续约42 d.说明反复鼻内给予适当抗原诱导免rn疫应答是可行的.rn在粘膜或系统途径中鼻内注射GTF生物活性rn微粒诱导了最高和最为持久的唾液免疫反应,有希rn望成为诱导粘膜免疫的又一种有效途径.rn[陈舟摘刘天佳校]