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目的:筛选有效抑制p53基因表达的靶位点,以研究其在哺乳动物细胞中的功能。方法:用Ambion公司的RNA干扰(RNAi)设计软件设计了3段针对野生型p53基因的长度为19nt的反向重复序列,在人工退火条件下形成双链,将其构建到pSilencer3.1-Hlneo载体上,与pcDNA3.1-HA-p53(野生型)载体共转染Cos7及293T细胞,用Westernblot检测HA-p53蛋白质的表达;将pCMV-GFP-p53与p53-RNAi或空载体共转入Cos7细胞,于激光扫描共聚焦显微镜下比较GFP-