【摘 要】
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目的:观察黄芪多精对基底细胞样乳腺癌细胞株MDA-MB-468细胞增殖和Akt蛋白磷酸化的影响.方法:用不同浓度的黄芪多耱(Astragalus polysaccharide,APS)干预MDA-MB-468细胞,用甲
【机 构】
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上海中医药大学龙华医院乳腺科,上海交通大学第九人民医院中医科
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目的:观察黄芪多精对基底细胞样乳腺癌细胞株MDA-MB-468细胞增殖和Akt蛋白磷酸化的影响.方法:用不同浓度的黄芪多耱(Astragalus polysaccharide,APS)干预MDA-MB-468细胞,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS干预对MDA-MB-468细胞增殖的量效和时效关系.用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞株l、2、4和7d后对磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt) (Thr308)和p-Akt (Ser473)蛋白表达水平的影响,以及p53/鼠双微体2(murine double minute 2,MDM2)信号转导通路中的关键靶点p53、MDM2和人第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白表达水平的影响.用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默PTEN的表达,用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞2d对p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)蛋白表达水平的影响.结果:1和0.5 mg/mL的APS对MDA-MB-468细胞的增殖有明显的抑制作用.1和0.5 mg/mL的APS干预1、2、4和7d后能下调p-Akt(Thr308)的表达;干预1和2d后下调p-Akt(Ser473)的表达,上调MDM2蛋白的表达；干预7d后上调p53和PTEN蛋白的表达.PTEN沉默后,APS在干预2d后对p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)的表达没有影响,细胞增殖的抑制率低于PTEN未沉默时.结论:APS能抑制MDA-MB-468细胞的增殖,下调MDA-MB-468细胞Akt磷酸化的水平,其抑制MDA-MB-468细胞增殖的机制可能与通过对p53/MDM2正负反馈环的调节从而上调p53和PTEN蛋白的表达有关.
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