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【摘要】目的：研究傣药黑蚂蚁（学名双齿多刺蚁）挥发油和脂溶性成分，为科学利用黑蚂蚁资源提供实验依据。方法：采用回流提取并用石油醚萃取得脂溶性成分，水蒸气蒸馏法提取挥发油;运用气相色谱-质谱联用技术分析其化学成分。结果：从黑蚂蚁脂溶性成分中鉴定39个成分，其中油酸（25.1%）和6-十八碳烯酸（17.93%）相对含量居高;从挥发油中鉴定41个化合物，以油酸（6.15%）和二十五烷（5.85%）较多。结论：油酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、胆甾醇和3，5-胆甾二烯为黑蚂蚁油脂的特征性成分;黑蚂蚁的脂溶性成分以脂肪酸类为主，而挥发油则以烃类物质为主。
【关键词】傣药;双齿多刺蚁;脂溶性成分;挥发油;气相色谱-质谱联用
【中图分类号】R284.1【文献标志码】A【文章编号】1007-8517（2019）1-0050-04
Abstract：ObjectiveToanalyzechemicalingredientsoffat-solublecompositionandvolatileoilfromDaimedicineofHeiMaYi（scientificname：Polyrhachisdives），inordertoprovideexperimentalbasisforreasonableutilizationofanimalmedicineofPolyrhachisdives.MethodEthanolrefluxextractionmethodwasusedtoextractmedicinalmaterialsofPolyrhachisdives，andpetroleumetherwasusedtoextractfat-solublecomponents.ThevolatileoilofPolyrhachisdiveswasextractedbysteamdistillation.ItsoilcomponentswereanalyzedbyGC-MStechnique.ResultThirty-ninecompoundswereidentifiedintheoilofPolyrhachisdives.Thecompoundswithhighercontentlevelincludedoleicacid（25.1%）and6-octadecenoicacid（17.93%）.Forty-onecompoundswereidentifiedinthevolatileoil.Thecompoundswithhighercontentlevelincludedoleicacid（6.15%）andpentacosane（5.85%）.Conclusionoleicacid，palmiticacid，palmitoleicacid，stearicacid，cholesterolandcholesta-3，5-dienewerecharacteristicconstituentsintheoilofPolyrhachisdives.FattyacidswerethemaincompoundsintheoilsofPolyrhachisdives，andhydrocarboncompoundswerethemaincompoundsinthevolatileoils.
Keywords：DaiMedicine;Polyrhachisdives;Fat-solubleComposition;VolatileOil;GC-MS
傣药黑蚂蚁属昆虫纲膜翅目蚁科昆虫双齿多刺蚁（PolyrhachisdivesSmith），又称拟黑多刺蚁、鼎突多刺蚁，主要产自云南、广西、广东等省，在我国为食药两用昆虫。《本草纲目》记载蚂蚁为“玄驹”，并有“独脚蚁治疗肿疽毒，捣涂之”。傣药称之为“摸郎”，有扶正固本、补肾壮阳、祛瘀通络之功效[1]。因富含氨基酸，锌、钙、镁、铁、锰等多种微量元素，D、B2、B12、C、E等多种维生素，及大量的糖类物质和高能物质三磷酸腺苷，民间常将黑蚁制成蚁粉或蚁酒服用，以健身防病[2-3]。现代研究发现黑蚁的醇提物有抗风湿、抗炎、抗抑郁、增强性功能、调节人体免疫功能、调节血糖和血脂、抗衰老和护肝等药理作用[3-5]。临床上以黑蚁为主药，治疗风湿、类风湿关节炎、糖尿病、肝炎、失眠、阳痿等疾病[2-3]。笔者在前人研究基础上，采用GC-MS法研究分析黑蚁的物质基础，探讨黑蚁脂溶性成分及挥发油的成分和组成，为科学合理利用傣药黑蚁提供实验依据。
1材料
黑蚂蚁购自大理金贝药材市场，经大理大学杨自忠教授鉴定为昆虫纲膜翅目蚁科双齿多刺蚁（PolyrhachisdivesSmith）。HP7890A/5975C型GC-MS联用仪（Agilent公司）。试剂均为国产AR。
2方法与结果
2.1挥发油的制备称取100g黑蚂蚁粉末（过2号筛）于圆底烧瓶中，加蒸馏水500mL，参照《中国药典》（2015年版/四部）“通则2204”挥发油测定法甲法提取[6]，至挥发油体积不再增加，冷却分层后分离挥发油，并用无水Na2SO4干燥[7]，得浅黄色油状物，冷藏备用。
2.2脂溶性成分的制备称取黑蚂蚁粉末20g，用95%乙醇索式提取1h，将提取液减压浓缩至小体积，用石油醚萃取3次，萃取液浓缩干，得浅黄色油状提取物，冷藏备用。
2.3脂溶性成分GC-MS分析条件气相色谱条件：HP-5MS石英毛细管柱（30m×250μm×0.25μm），高纯氦为载气，1mL/min恒流，分流比10∶1，进样量1μL，进样口温度250℃;柱升温程序為起始80℃，按10℃/min升温至190℃，再以5℃·min-1升温至290℃，保留6min。质谱条件：EI离子源，离子源温度230℃，电子能量70eV，溶剂延迟3min，质量扫描范围m/z12～550。 2.4挥发油GC-MS分析条件气相色谱条件：同2.3项下;柱升温程序为起始120℃，按10℃/min升温至200℃，再以5℃/min升温至220℃，保留5min，后以2.5℃/min升温至290℃，保留10min。质谱条件：同2.3项下。
2.5黑蚂蚁脂溶性成分和挥发油分析结果黑蚂蚁脂溶性成分和挥发油分别按上述检测条件进行GC-MS分析，得总离子流图，如图1所示。经NIST11.L质谱库检索，取相似度90%以上成分，采用面积归一化法计算相对含量。从黑蚂蚁脂溶性成分中分离出51个色谱峰，检测鉴定出39个化合物，相对含量占总量85.16%，结果见表1;从挥发油中分离出59个色谱峰，并鉴定出41个化合物，占总量61.11%。结果见表2。
3討论
研究从黑蚂蚁脂溶性成分中鉴定39个化合物，相对含量占总量85.16%，主要成分类型有脂肪酸，烷烃，甾类和脂肪醇。不饱和脂肪酸含量最高，占47.03%，仅油酸和6-十八碳烯酸各占25.1%，17.93%;烷烃检出数目最多，有12个，占15.42%，其中二十七烷（2.51%），9-甲基十九烷（3.67%），三十一烷（3.44%）含量较高;另外检出胆固醇（3.72%），胆甾-3，5-二烯（0.15%），胆甾-4-烯-3-酮（0.26%）和β-谷甾醇（0.36%）4个甾类成分;还检出少量卤代烃1-氯二十烷（0.86%）和1-氯二十七烷（1.61%）。从挥发油中鉴定41个成分，相对含量占总量61.11%，主要成分类型为烷烃，烯烃，脂肪醇和卤代烃。共检出烷烃19个，其数目和含量均最高，占38.3%，其中十七烷（3.67%），二十五烷（5.85%），二十六烷（5.05%），二十三烷（3.8%），二十八烷（3.03%）二十四烷（4.93%），二十九烷（2.62%）含量较高;检出10个烯烃，占4.35%;另外检出油酸（6.15%），2个卤代烃成分1-碘代十八烷（4.93%）和1-氯二十七烷（1.73%）。本研究首次从黑蚁中发现胆甾-4-烯-3-酮、1-氯二十烷、1-氯二十七烷、1-碘代十八烷及多个烃类成分。
脂溶性成分和挥发油中检出18个共有成分，主要为烷烃，脂肪醇，脂肪酸及其酯，其中烷烃数目较多有10个，但含量差异大;均检出棕榈酸甲酯、棕榈酸和油酸，以棕榈酸和油酸在脂溶性成分中含量较高;均检出1-氯二十七烷，其含量相当。黑蚁的脂溶性成分以脂肪酸类为主，并发现4个甾体类成分;而挥发油则以烃类物质为主。油酸（OA）和棕榈酸（PA）是最常见的膳食脂肪酸。OA刺激肝癌HepG2细胞可引起自噬并促进凋亡[8];PA则刺激引起自噬抗凋亡，提示这两种膳食脂肪酸引起的自噬所发挥的生物学作用可能不同[9]。烃类化学成分是昆虫信息素的活性成分，对昆虫的行为活动起作用[10-11]。
多位学者对黑蚁化学成分进行了研究报道。沈立荣等[12]采用超临界CO2萃取蚁油经GC-MS分析出24个化合物，包含脂肪酸、烃类、甾体、硫醇等类型，主要成分为9-十八碳烯酸、油酸、亚油酸及其酯、胆甾醇和3，5-胆甾二烯等物质;韦桂宁等[13]从黑蚁石油醚部位甲酯化产物中鉴定出13个脂肪酸，其中棕榈酸和油酸含量较高;郑巍等[14]用系统分离方法从黑蚁氯仿部位分离到7个化合物;王婧等[15]发现黑蚁的水提液风味物质主要为胺类、杂环、醇、醛、酮等大极性物质。本研究的黑蚁脂溶性成分与文献[12]均检出油酸、棕榈酸、9-甲基十九烷、二十二碳烯、胆甾醇和3，5-胆甾二烯;与文献[13]有6个相同成分，为月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸和油酸，其含量均为油酸较高;与文献[14]有棕榈酸、硬脂酸、油酸和β-谷甾醇4个共有成分。可见油酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、胆甾醇和3，5-胆甾二烯等为黑蚁药材中稳定存在的特征性成分。
参考文献
[1]云南省食品药品监督管理局.云南省中药材标准（第一册）[S].昆明：云南科学技术出版社，2005：50-51.
[2]王玉玲，王艳萍.拟黑多刺蚂蚁的食用价值及保健功能[J].农产品加工（学刊），2010（10）：77-79.
[3]赵大成，秦雪梅，申国华，等.薄层扫描法测定蚂蚁药材及其风湿克酒中亮氨酸的含量[J].中国药房，2004，15（2）：111-112.
[4]贺胜英，常征，郑有鹤.我国鼎突多刺蚁的研究进展[J].廊坊师范学院学报（自然科学版），2012，12（1）：54-57.
[5]韦桂宁，楚世峰，苏华，等.拟黑多刺蚁醇提物抗抑郁作用研究[J].中国药理学通报，2015，31（9）：1280-1286.
[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）[S].北京：中国医药科技出版社，2015：203-204.
[7]孙迎娜，班书贤，王瑞明，等.青翘与老翘挥发油化学成分的比较研究[J].中国药房，2016，27（15）：2087-2090.
[8]刘凯，徐树莹，徐斌，等.晚期自噬在非酒精性脂肪肝中的促凋亡作用[J].北京医学，2011，33（12）：950-952.
[9]刘芳，刘凯，刘道洁，等.棕榈酸对肝癌HepG2细胞自噬和凋亡的影响[J].山东医药，2014，54（12）：8-9.
[10]钟伟，殷幼平.蜚蠊聚集信息素的研究进展[J].中国媒介生物学及控制杂志，2002，13（5）：392-393.
[11]吕燕青，何余容，陈科伟.拟澳洲赤眼蜂对小菜蛾腹部鳞片和卵表十三种饱和烷烃的接触反应[J].植物保护学报，2010，37（6）：535-540.
[12]沈立荣，任玉翠，冯凤琴，等.超临界CO2萃取鼎突多刺蚁蚁油的正交试验和GC-MS分析[J].中国中药杂志，2005，30（1）：33-36.
[13]韦桂宁，苏启表，曾宪彪，等.拟黑多刺蚁乙醇提取物石油醚部位抗痛风作用及物质基础研究[J].中药药理与临床，2013，29（1）：99-103.
[14]郑巍，郭良君，谭兴起.拟黑多刺蚁化学成分的研究[J].中南药学，2012，10（3）：178-180.
[15]王婧，刘通讯.拟黑多刺蚁的理化分析[J].现代食品科技，2010，26（10）：1092-1095，1163.
（收稿日期：2018-11-02编辑：陶希睿）
【关键词】傣药;双齿多刺蚁;脂溶性成分;挥发油;气相色谱-质谱联用
【中图分类号】R284.1【文献标志码】A【文章编号】1007-8517（2019）1-0050-04
Abstract：ObjectiveToanalyzechemicalingredientsoffat-solublecompositionandvolatileoilfromDaimedicineofHeiMaYi（scientificname：Polyrhachisdives），inordertoprovideexperimentalbasisforreasonableutilizationofanimalmedicineofPolyrhachisdives.MethodEthanolrefluxextractionmethodwasusedtoextractmedicinalmaterialsofPolyrhachisdives，andpetroleumetherwasusedtoextractfat-solublecomponents.ThevolatileoilofPolyrhachisdiveswasextractedbysteamdistillation.ItsoilcomponentswereanalyzedbyGC-MStechnique.ResultThirty-ninecompoundswereidentifiedintheoilofPolyrhachisdives.Thecompoundswithhighercontentlevelincludedoleicacid（25.1%）and6-octadecenoicacid（17.93%）.Forty-onecompoundswereidentifiedinthevolatileoil.Thecompoundswithhighercontentlevelincludedoleicacid（6.15%）andpentacosane（5.85%）.Conclusionoleicacid，palmiticacid，palmitoleicacid，stearicacid，cholesterolandcholesta-3，5-dienewerecharacteristicconstituentsintheoilofPolyrhachisdives.FattyacidswerethemaincompoundsintheoilsofPolyrhachisdives，andhydrocarboncompoundswerethemaincompoundsinthevolatileoils.
Keywords：DaiMedicine;Polyrhachisdives;Fat-solubleComposition;VolatileOil;GC-MS
傣药黑蚂蚁属昆虫纲膜翅目蚁科昆虫双齿多刺蚁（PolyrhachisdivesSmith），又称拟黑多刺蚁、鼎突多刺蚁，主要产自云南、广西、广东等省，在我国为食药两用昆虫。《本草纲目》记载蚂蚁为“玄驹”，并有“独脚蚁治疗肿疽毒，捣涂之”。傣药称之为“摸郎”，有扶正固本、补肾壮阳、祛瘀通络之功效[1]。因富含氨基酸，锌、钙、镁、铁、锰等多种微量元素，D、B2、B12、C、E等多种维生素，及大量的糖类物质和高能物质三磷酸腺苷，民间常将黑蚁制成蚁粉或蚁酒服用，以健身防病[2-3]。现代研究发现黑蚁的醇提物有抗风湿、抗炎、抗抑郁、增强性功能、调节人体免疫功能、调节血糖和血脂、抗衰老和护肝等药理作用[3-5]。临床上以黑蚁为主药，治疗风湿、类风湿关节炎、糖尿病、肝炎、失眠、阳痿等疾病[2-3]。笔者在前人研究基础上，采用GC-MS法研究分析黑蚁的物质基础，探讨黑蚁脂溶性成分及挥发油的成分和组成，为科学合理利用傣药黑蚁提供实验依据。
1材料
黑蚂蚁购自大理金贝药材市场，经大理大学杨自忠教授鉴定为昆虫纲膜翅目蚁科双齿多刺蚁（PolyrhachisdivesSmith）。HP7890A/5975C型GC-MS联用仪（Agilent公司）。试剂均为国产AR。
2方法与结果
2.1挥发油的制备称取100g黑蚂蚁粉末（过2号筛）于圆底烧瓶中，加蒸馏水500mL，参照《中国药典》（2015年版/四部）“通则2204”挥发油测定法甲法提取[6]，至挥发油体积不再增加，冷却分层后分离挥发油，并用无水Na2SO4干燥[7]，得浅黄色油状物，冷藏备用。
2.2脂溶性成分的制备称取黑蚂蚁粉末20g，用95%乙醇索式提取1h，将提取液减压浓缩至小体积，用石油醚萃取3次，萃取液浓缩干，得浅黄色油状提取物，冷藏备用。
2.3脂溶性成分GC-MS分析条件气相色谱条件：HP-5MS石英毛细管柱（30m×250μm×0.25μm），高纯氦为载气，1mL/min恒流，分流比10∶1，进样量1μL，进样口温度250℃;柱升温程序為起始80℃，按10℃/min升温至190℃，再以5℃·min-1升温至290℃，保留6min。质谱条件：EI离子源，离子源温度230℃，电子能量70eV，溶剂延迟3min，质量扫描范围m/z12～550。 2.4挥发油GC-MS分析条件气相色谱条件：同2.3项下;柱升温程序为起始120℃，按10℃/min升温至200℃，再以5℃/min升温至220℃，保留5min，后以2.5℃/min升温至290℃，保留10min。质谱条件：同2.3项下。
2.5黑蚂蚁脂溶性成分和挥发油分析结果黑蚂蚁脂溶性成分和挥发油分别按上述检测条件进行GC-MS分析，得总离子流图，如图1所示。经NIST11.L质谱库检索，取相似度90%以上成分，采用面积归一化法计算相对含量。从黑蚂蚁脂溶性成分中分离出51个色谱峰，检测鉴定出39个化合物，相对含量占总量85.16%，结果见表1;从挥发油中分离出59个色谱峰，并鉴定出41个化合物，占总量61.11%。结果见表2。
3討论
研究从黑蚂蚁脂溶性成分中鉴定39个化合物，相对含量占总量85.16%，主要成分类型有脂肪酸，烷烃，甾类和脂肪醇。不饱和脂肪酸含量最高，占47.03%，仅油酸和6-十八碳烯酸各占25.1%，17.93%;烷烃检出数目最多，有12个，占15.42%，其中二十七烷（2.51%），9-甲基十九烷（3.67%），三十一烷（3.44%）含量较高;另外检出胆固醇（3.72%），胆甾-3，5-二烯（0.15%），胆甾-4-烯-3-酮（0.26%）和β-谷甾醇（0.36%）4个甾类成分;还检出少量卤代烃1-氯二十烷（0.86%）和1-氯二十七烷（1.61%）。从挥发油中鉴定41个成分，相对含量占总量61.11%，主要成分类型为烷烃，烯烃，脂肪醇和卤代烃。共检出烷烃19个，其数目和含量均最高，占38.3%，其中十七烷（3.67%），二十五烷（5.85%），二十六烷（5.05%），二十三烷（3.8%），二十八烷（3.03%）二十四烷（4.93%），二十九烷（2.62%）含量较高;检出10个烯烃，占4.35%;另外检出油酸（6.15%），2个卤代烃成分1-碘代十八烷（4.93%）和1-氯二十七烷（1.73%）。本研究首次从黑蚁中发现胆甾-4-烯-3-酮、1-氯二十烷、1-氯二十七烷、1-碘代十八烷及多个烃类成分。
脂溶性成分和挥发油中检出18个共有成分，主要为烷烃，脂肪醇，脂肪酸及其酯，其中烷烃数目较多有10个，但含量差异大;均检出棕榈酸甲酯、棕榈酸和油酸，以棕榈酸和油酸在脂溶性成分中含量较高;均检出1-氯二十七烷，其含量相当。黑蚁的脂溶性成分以脂肪酸类为主，并发现4个甾体类成分;而挥发油则以烃类物质为主。油酸（OA）和棕榈酸（PA）是最常见的膳食脂肪酸。OA刺激肝癌HepG2细胞可引起自噬并促进凋亡[8];PA则刺激引起自噬抗凋亡，提示这两种膳食脂肪酸引起的自噬所发挥的生物学作用可能不同[9]。烃类化学成分是昆虫信息素的活性成分，对昆虫的行为活动起作用[10-11]。
多位学者对黑蚁化学成分进行了研究报道。沈立荣等[12]采用超临界CO2萃取蚁油经GC-MS分析出24个化合物，包含脂肪酸、烃类、甾体、硫醇等类型，主要成分为9-十八碳烯酸、油酸、亚油酸及其酯、胆甾醇和3，5-胆甾二烯等物质;韦桂宁等[13]从黑蚁石油醚部位甲酯化产物中鉴定出13个脂肪酸，其中棕榈酸和油酸含量较高;郑巍等[14]用系统分离方法从黑蚁氯仿部位分离到7个化合物;王婧等[15]发现黑蚁的水提液风味物质主要为胺类、杂环、醇、醛、酮等大极性物质。本研究的黑蚁脂溶性成分与文献[12]均检出油酸、棕榈酸、9-甲基十九烷、二十二碳烯、胆甾醇和3，5-胆甾二烯;与文献[13]有6个相同成分，为月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸和油酸，其含量均为油酸较高;与文献[14]有棕榈酸、硬脂酸、油酸和β-谷甾醇4个共有成分。可见油酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、胆甾醇和3，5-胆甾二烯等为黑蚁药材中稳定存在的特征性成分。
参考文献
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[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）[S].北京：中国医药科技出版社，2015：203-204.
[7]孙迎娜，班书贤，王瑞明，等.青翘与老翘挥发油化学成分的比较研究[J].中国药房，2016，27（15）：2087-2090.
[8]刘凯，徐树莹，徐斌，等.晚期自噬在非酒精性脂肪肝中的促凋亡作用[J].北京医学，2011，33（12）：950-952.
[9]刘芳，刘凯，刘道洁，等.棕榈酸对肝癌HepG2细胞自噬和凋亡的影响[J].山东医药，2014，54（12）：8-9.
[10]钟伟，殷幼平.蜚蠊聚集信息素的研究进展[J].中国媒介生物学及控制杂志，2002，13（5）：392-393.
[11]吕燕青，何余容，陈科伟.拟澳洲赤眼蜂对小菜蛾腹部鳞片和卵表十三种饱和烷烃的接触反应[J].植物保护学报，2010，37（6）：535-540.
[12]沈立荣，任玉翠，冯凤琴，等.超临界CO2萃取鼎突多刺蚁蚁油的正交试验和GC-MS分析[J].中国中药杂志，2005，30（1）：33-36.
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[14]郑巍，郭良君，谭兴起.拟黑多刺蚁化学成分的研究[J].中南药学，2012，10（3）：178-180.
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（收稿日期：2018-11-02编辑：陶希睿）