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利用TIRF显微镜动态实时地观测了GLUT4囊泡在脂肪细胞内的运动．并针对TIRF显微镜消散场成像的特点．提出了一种新的三维单粒子跟踪算法。算法首先针对囊泡的荧光淬灭问题．对荧光强度作了校正：然后．应用自适应的背景减除算法．分割出了运动的囊泡．最后，在跟踪过程中引入了Kalman滤波．减小了搜索的范围．从而避免了背景噪声以及虚假目标的干扰。对囊泡在胞内的长距离运动作跟踪实验，结果表明算法不但在成像平面上取得了很好的跟踪效果，而且也有效地推算了囊泡在垂直于成像平面方向上的运动。