截断型人可溶性CD40L的表达与纯化

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gongjinjie

【摘要】

：

目的表达相对分子质量18000的截断型人可溶性CD40L。方法针对人CD40L(Glu108-Leu261)设计引物，以全长人CD40L为模板，扩增目的基因，经pGEM-T中间载体进一步连接到pQD40载体，构建pQ

【作者】

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易学瑞孟凌华邵光袁有成李斌杨联萍孔祥平

【机构】

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解放军第四五八医院全军传染病中心广州510602,华南农业大学食品学院广州510642,中山大学第二临床医学院消化内科广州510120

【出处】

：

中国生物制品学杂志

【发表日期】

：

2004年6期

【关键词】

：

包涵体共刺激分子肿瘤表达纯化亲和层析 CD40L CD40L Inclusion body Affinity chromatography SP2/0

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目的表达相对分子质量18000的截断型人可溶性CD40L。方法针对人CD40L(Glu108-Leu261)设计引物，以全长人CD40L为模板，扩增目的基因，经pGEM-T中间载体进一步连接到pQD40载体，构建pQE/sCD40L表达载体。转化E．coliMl5后经IPTG诱导表达，分离、洗涤包涵体，并利用M-NTA亲和层析纯化目的蛋白，经复性后检测对骨髓瘤细胞SP2／0细胞株的抑制作用。结果克隆的目的基因为4S0bp，经测序与文献报道一致，所构建的菌株(M15／pQE/sCD40L)经诱导表达目的蛋白

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