【摘 要】
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为获得安全、高效、高产量的胶原蛋白酶生产方法,本实验采用形态学特征、生理生化特征的常规鉴定,结合16S rDNA序列测定,对一株产胞外胶原蛋白酶的菌株AL-13进行鉴定,并以胶
【机 构】
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大连工业大学生物工程学院,内蒙古河套农牧业技术研究院
【基金项目】
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内蒙古自治区科技重大专项项目(222089)
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为获得安全、高效、高产量的胶原蛋白酶生产方法,本实验采用形态学特征、生理生化特征的常规鉴定,结合16S rDNA序列测定,对一株产胞外胶原蛋白酶的菌株AL-13进行鉴定,并以胶原蛋白酶活性为指标,采用单因素实验优化温度、pH、接种量等产酶培养条件,采用单因素实验及响应曲面法优化产酶培养基。结果显示,AL-13可鉴定为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus),于25℃、初始pH 8.0、接种量6%、发酵培养48 h时得到最大酶活(154.89 U/mL),此时培养基成分为葡萄糖8.14 g/L、牛肉膏11.63 g/L、氯化钙0.17 g/L、磷酸氢二钾2.08 g/L、氯化钠9.48 g/L。产酶条件优化后最高酶活较优化前(16.14 U/mL)提高了约9.6倍。为检验试验结果的可靠性,采用优化后的产酶条件进行3次平行试验,得到的酶活为153.06±3.73 U/mL,此结果与预测值接近,相对误差为0.04%。本实验成功优化了一株产胶原蛋白酶细菌的产酶条件。
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