探讨DKK3在人皮肤恶性黑素瘤细胞及组织中的表达及其对黑素瘤细胞A375增殖与凋亡的影响。
方法通过反转录（RT）-PCR及实时定量PCR分析DKK3 mRNA在人恶性黑素瘤细胞系HM、A375、WM451、WM35、SK-MEL-1、Hs-695T和MDA-MB-435s及38例原发性黑素瘤、4例转移性黑素瘤和20例色素痣组织中的相对表达。分别转染恶性黑素瘤A375细胞pcDNA3.1（+）-Flag-DKK3质粒（实验组）和pcDNA3.1（+）-Flag-Vector质粒（对照组），RT-PCR验证DKK3的过表达；通过CCK8法和平板克隆实验分析DKK3对A375细胞增殖的影响，流式细胞仪分析DKK3对A375细胞凋亡的影响，Western印迹检测A375细胞周期和凋亡相关蛋白的表达。
结果DKK3 mRNA在WM35细胞系表达下调，HM、A375、WM451、SK-MEL-1和Hs-695T细胞系表达缺失，MDA-MB-435s细胞高表达。与色素痣相比，DKK3 mRNA在人恶性黑素瘤组织表达降低（P < 0.001）。与对照组A375细胞相比（100%），实验组A375细胞克隆形成效率明显受到抑制（23.22% ± 3.55%）；同时转染后24、48、72 h细胞活性受到明显抑制（均P < 0.05）。流式细胞仪检测发现，与对照组A375细胞（G1期，25.38% ± 2.92%）相比，实验组A375细胞明显阻滞于G1期（48.68% ± 3.92%，P < 0.001），细胞凋亡率明显升高（P < 0.001）。与对照组A375细胞相比，实验组周期凋亡相关蛋白p21、Bax、活化的parp和活化的Caspase-3表达升高，细胞周期蛋白D1和Bcl2表达降低（均P < 0.001）。
结论DKK3在人皮肤恶性黑素瘤组织中表达下调，可能作为潜在的抑癌基因参与皮肤恶性黑素瘤的进展。