【摘 要】
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目的 研究芹菜素(AGN)对MPP+诱发的帕金森细胞模型中自噬、氧化应激的影响及神经保护作用.方法 CCK-8筛选AGN有效浓度,SH-SY5Y细胞分6组:①对照组;②MPP+组;③A组:AGN浓度10μmol/L;④B组:AGN浓度20μmol/L;⑤C组:AGN浓度40μmol/L;⑥D组:AGN浓度100μmol/L.确定AGN有效浓度后将细胞分为3组:对照组、MPP+组及AGN+MPP+组.检测细胞凋亡及Caspase3、Bcl-2、Bax、LC3-II、LC3-I、Beclin-1、ULK1蛋白
【机 构】
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潍坊市人民医院神经内科,山东 潍坊 261000;潍坊市中医院妇科,山东 潍坊 261000;潍坊市中医院老年科,山东 潍坊 261000;潍坊市中医院骨科,山东 潍坊 261000;山东第一医科大学
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目的 研究芹菜素(AGN)对MPP+诱发的帕金森细胞模型中自噬、氧化应激的影响及神经保护作用.方法 CCK-8筛选AGN有效浓度,SH-SY5Y细胞分6组:①对照组;②MPP+组;③A组:AGN浓度10μmol/L;④B组:AGN浓度20μmol/L;⑤C组:AGN浓度40μmol/L;⑥D组:AGN浓度100μmol/L.确定AGN有效浓度后将细胞分为3组:对照组、MPP+组及AGN+MPP+组.检测细胞凋亡及Caspase3、Bcl-2、Bax、LC3-II、LC3-I、Beclin-1、ULK1蛋白表达,检测丙二醇、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平.分析每组GFP-LC3斑点.结果 AGN在40μmol/L时能显著降低MPP+诱导的细胞毒性损伤,选择40μmol/L作为最佳药物保护浓度进行后续研究.AGN+MPP+组细胞凋亡率较MPP+组下降(P<0.05).相较于MPP+组,AGN+MPP+组Caspase3表达降低,Bcl-2/Bax值升高(P值均<0.01).与MPP+组比较,AGN+MPP+组抑制MDA的表达(P<0.05),恢复GPX和SOD的活性(P<0.05).AGN+MPP+组细胞内GFP-LC3斑点较MPP+组显著减少(P<0.05).对比MPP+组,AGN+MPP+组LC3-II/LC3-I比值及Beclin-1、ULK1表达显著降低(P值均<0.05).结论 AGN能减轻MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,增强抗氧化能力,其细胞保护作用可能与降低细胞自噬水平相关.
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