建立了测定柠檬酸的多波长分光光度法。在p H 6.15的Tris-盐酸缓冲溶液中,灿烂绿与柠檬酸在可见光区发生褪色反应,生成具有三个明显负吸收峰的绿色离子缔合物,并出现褪色现象。最大、次大和最小的负吸收波长分别位于652 nm、582 nm和426 nm处。柠檬酸在0.02~3.84 mg/L(652 nm和582 nm)和0.48~3.84 mg/L(426 nm)范围内遵从比尔定律,表观摩尔吸光系数(κ)分别为3.33×104、2.84×104和1.44×104 L/(mol·cm),定量限为0.019 g/100 g(652 nm和582 nm)和0.45 g/100 g(426 nm)。采用双波长或三波长叠加法测定,它们的灵敏度分别可达6.16×104 L/(mol·cm)和7.61×104 L/(mol·cm),定量限均为0.019 g/100 g。还探讨了适宜的反应条件、主要分析化学性质及络合比。方法用于新鲜柠檬中柠檬酸含量的测定,回收率为98.85%~101.1%,相对标准偏差(n=6)为2.2%~2.5%。