【摘 要】
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应用RT-PCR技术从FCV的F81细胞培养物中获得了该病毒的衣壳蛋白编码基因,再用一对特异性的引物,扩增其内所需的目的基因将其亚克隆到pET-28a载体,构建pET-FCV表达载体。经酶
【机 构】
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广东省农科院兽医研究所,吉林大学畜牧兽医学院
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应用RT-PCR技术从FCV的F81细胞培养物中获得了该病毒的衣壳蛋白编码基因,再用一对特异性的引物,扩增其内所需的目的基因将其亚克隆到pET-28a载体,构建pET-FCV表达载体。经酶切,PCR及测序鉴定为FCV的特异序列。将阳性重组表达质粒转化E.Coli BL-21(DE3)菌,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE及Western-blot检测,显示表达产物以包涵体的形式存在,可与FCV阳性血产生特异性反应,表明表达产物具有良好的免疫反应原性。
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