人ureb1在大肠杆菌中高效表达及其抗体的制备

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cats2106
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目的:构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒,以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法:用XhoI/Not I从pGU-2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX-4T-2的XhoI/NotI大片段连接,构建表达GST-hureb1融合蛋白的重组载体。转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。以粗制的GST-hurebl融合蛋白分别免疫大白兔和小鼠,制备抗hureb1的多克隆抗体和单克隆抗体,采用Westem Blot进行特异性鉴定。结果:构建了高效表达GST-hur
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