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目的探讨苦参碱对H9c2细胞缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法建立H9c2细胞缺氧复氧模型,用苦参碱进行干预。取对数生长期细胞,采用随机数字表法随机分成4组:(1)对照组:不作任何处理;(2)缺氧复氧组:将细胞放入缺氧箱中缺氧12 h,再复氧6 h;(3)和(4)苦参碱处理组:分别用含10μmol/L和30μmol/L苦参碱的DMEM完全培养基预处理细胞12 h,然后进行缺氧复氧处理。处理后用MTT方法检测细胞存活率,收集细胞上清,检测丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Annexin V-FITC/PI双标法和Tunnel法检测细胞凋亡水平,流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)含量变化,Western Blot检测凋亡信号调节激酶1(ASK1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达量的变化。结果 (1)细胞生存率:与缺氧复氧组(47.7%±3.4%)比较,苦参碱低剂量组(59.3%±3.1%)和高剂量组(70.6%±2.7%)显著提高(均为P<0.05);(2)细胞凋亡率:与缺氧复氧组(67.4%±6.8%)比较,苦参碱低剂量组(34.6%±4.2%)和高剂量组(18.5%±1.9%)明显降低(均为P<0.05);(3)细胞上清中MDA含量:与缺氧复氧组[(2.17±0.19)nmol/mgprot]比较,苦参碱低剂量组[(1.14±0.21)nmol/mgprot]和高剂量组[(0.83±0.14)nmol/mgprot]显著降低(均为P<0.05);(4)SOD活性:与缺氧复氧组[(128.45±9.34)U/mgprot]比较,苦参碱低剂量组[(147.54±6.47)U/mgprot]和高剂量组[(179.76±5.85)U/mgprot]明显增加(均为P<0.05);(5)ROS含量的荧光值:与缺氧复氧组(935±73)比较,苦参碱低剂量组(1 165±75)和高剂量组(1 535±123)明显增加(均为P<0.05);(6)JNK蛋白表达量:与缺氧复氧组(0.212±0.015)比较,苦参碱低剂量组(0.408±0.027)和高剂量组(0.729±0.085)明显增加(均为P<0.05);(7)ASK1蛋白表达量:与缺氧复氧组(0.343±0.025)比较,苦参碱低剂量组(0.428±0.027)和高剂量组(0.759±0.067)明显增加(均为P<0.05);(8)Bcl-2蛋白表达量:与缺氧复氧组(0.821±0.055)比较,苦参碱低剂量组(0.597±0.047)和高剂量组(0.329±0.037)明显降低(均为P<0.05)。结论苦参碱可以通过影响细胞氧化应激及JNK信号通路,对细胞缺血再灌注损伤起到保护作用。