SELEX实验中核酸-蛋白复合物分离方法对富集库亲和力的影响

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengzheng369
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目的 比较SELEX实验中,核酸—蛋白复合物分离技术的差异对筛选富集库亲和力的影响。方法以β—转化生长因子Ⅱ型受体为靶目标,采用不同技术路线从ssDNA随机库中获取亲和富集库:技术路线1,靶目标预先被吸附到96孔微量滴定板后,再进行筛选,从滴定板上洗脱结合核酸;技术路线2,溶液中筛选、硝酸纤维膜截留核酸—蛋白复合物,从膜上回收结合核酸;通过膜结合测定、凝胶阻滞测定实验检测筛选富集库对靶目标的亲和力。结果 经4轮筛选后,技术路线1来源的富集库与初始随机库相似,对靶目标无亲和力;而技术路线2来源富集库对靶目标
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