COX-2启动子在胰腺癌细胞中活性的检测

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目的 通过基因转染检测COX-2启动子在胰腺癌细胞中的活性.方法 利用已构建的包含COX-2启动子和报告基因SSTR2的E1剔出重组腺病毒AdCOX-2-SSTR2转染胰腺癌细胞BxPC-3,包含CAG启动子的AdCAG-SSTR2作为阳性对照.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法分析检测SSTR2在细胞中的表达.Real Time PCR检测bax、VEGF的表达.结果 AdCAG-SSTR2转染胰腺癌细胞后检测到SSTR2 mRNA的表达,是内参β-actin的24%,在55KDa处检测到SSTR2蛋白条带,bax的表达量明显升高,VEGF的表达量明显下降,分别是对照组的3.18倍和0.23倍;AdCOX-2-SSTR2转染胰腺癌细胞则未检测到SSTR2mRNA和蛋白明显的表达,bax、VEGF的表达也无明显变化,分别是对照组的1.23倍、1.12倍.结论 在胰腺癌细胞株BxPC-3中COX-2启动子驱动SSTR2表达未显示出肿瘤特异性启动子的优势。

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