【摘 要】
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目的 研究钙结合蛋白S100A2对Wnt/β-eatenin信号途径活性的影响,并探讨其可能的机制.方法 原核诱导表达GST-hS100A2,经纯化后加入骨肉瘤细胞株MG63和人结肠癌细胞株HCTl 16
【机 构】
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重庆医科大学生物医学工程系,Molecular Oncology Laboratory
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目的 研究钙结合蛋白S100A2对Wnt/β-eatenin信号途径活性的影响,并探讨其可能的机制.方法 原核诱导表达GST-hS100A2,经纯化后加入骨肉瘤细胞株MG63和人结肠癌细胞株HCTl 16的培养液中,Western blot检测细胞中β-catenin含量的变化;荧光素酶活性分析法检测S100A2对HEK293细胞中β-catenin/TCF4活性的影响;以表达GSK-3β、DVL、Axin的相应质粒分别转染HEK293细胞,GST-Pulldown/Western blot实验检测S100A2与这些蛋白质和β-catenin之间的相互作用.结果 S100A2使MG63和HCT116细胞中β-catenin含量增加、β-eatenin/TCF4活性增强;S100A2分别与β-catenin和GSK-3β之间存在相互作用,而与DVL和Axin之间则未发现相互作用.结论 S100A2可以上调Wnt/β-catenin信号途径的活性,其机制柯能涉及S100A2与β-catenin和GSK-3β之间的相互作用.
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